NgR特異性siRNA及NT-3基因轉(zhuǎn)染對大鼠脊髓損傷修復(fù)的影響.pdf

1、目的:研究NgR特異性siRNA體內(nèi)干擾及NT-3基因體內(nèi)轉(zhuǎn)染對大鼠脊髓損傷修復(fù)的作用。
　　方法:選用由中南大學實驗動物部提供的SD大鼠108只，體重200-250g，雌雄不限。隨機平均分為假手術(shù)組(n=27)、手術(shù)對照組(n=27)、NgR-siRNA組(n=27)和NgR-siRNA+NT-3組(n=27)。每組按照手術(shù)后12h、1d、2d、3d、5d、7d、14d、21d和28d9個時間點再平均分為9個小組，每小組3只。在

2、T8椎板水平，用做好標記的顯微剪刀剪斷脊髓的背側(cè)2/3，制作大鼠半橫斷損傷模型，用微量注射器自損傷處頭尾兩端緩慢注入細胞濃度1×106/ml相應(yīng)細胞懸液10μl，5min內(nèi)注射完畢留針5min，并用醫(yī)用生物膠封閉針孔防止細胞懸液順針道溢出。利用BBB評分評價大鼠運動功能恢復(fù)情況;相應(yīng)時間點獲取損傷段脊髓標本，利用QPCR、Wb測定NT-3、NgR、GAP-43基因表達的變化，綜合評價RNA干擾沉默NgR基因及聯(lián)合NT-3基因轉(zhuǎn)染對大鼠脊

3、髓損傷后修復(fù)的影響。所得數(shù)據(jù)采用均數(shù)和標準差進行一般描述;各組之間的比較采用方差分析，進行兩兩比較。
　　結(jié)果:1、脊髓損傷術(shù)后7d、14d、21d、28d NgR-siRNA+NT-3組BBB評分明顯高于NgR-siRNA組、損傷對照組，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。2、QPCR結(jié)果顯示:NgR-siRNA+NT-3組NT-3、GAP-43基因表達水平升高更明顯，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05); NgR-siRNA+NT-3組Ng