黃芪靈芝固態(tài)發(fā)酵及其功效評(píng)價(jià).pdf

1、中藥類獸藥通過(guò)提高機(jī)體免疫力從而起到防病治病的目的，具有低毒，無(wú)殘留的特點(diǎn)，可以在抗生素類藥物的休藥期作為替代藥物使用。但目前市場(chǎng)上的中獸藥劑型少、劑量大、成本高，因此其在畜牧業(yè)中的應(yīng)用受到限制。而中藥經(jīng)過(guò)發(fā)酵后，不僅可以增加有效成分溶出，還可以改變其有效成分，使之產(chǎn)生新的性味，從而達(dá)到增加功效，降低劑量等目的。本論文系統(tǒng)研究了以黃芪為主要原料的靈芝固態(tài)發(fā)酵、靈芪菌質(zhì)有效成分提取和菌質(zhì)提取液功效評(píng)價(jià)，結(jié)果表明：
　　 1.黃芪經(jīng)

2、過(guò)50min不同溫度濕熱滅菌處理后，黃芪多糖和黃酮含量無(wú)顯著變化，皂甙含量隨處理溫度升高而降低，但105℃時(shí)黃芪皂甙含量與對(duì)照差異不顯著。因此藥性基質(zhì)的滅菌條件為105℃、50min。
　　 2.靈芝菌絲體DNA含量不隨培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基組成和培養(yǎng)條件的變化而改變，并且黃芪和麩皮對(duì)靈芝DNA含量測(cè)定無(wú)影響。表明靈芪菌質(zhì)DNA含量可衡量靈芝生物量。
　　 3.比較液態(tài)和固態(tài)時(shí)黃芪與靈芝發(fā)酵作用，表明液態(tài)發(fā)酵時(shí)，添加量大于1.

3、5％時(shí)黃芪對(duì)靈芝的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用。固態(tài)發(fā)酵時(shí)，黃芪對(duì)靈芝生長(zhǎng)的抑制程度與培養(yǎng)基中黃芪含量無(wú)顯著關(guān)系。確定采用黃芪含量為50％的固體培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵。
　　 4.優(yōu)化得到靈芝與黃芪的固態(tài)發(fā)酵條件為：固體培養(yǎng)基黃芪含量為50％，發(fā)酵時(shí)間30d，接種量15％，物料厚度為3cm，起始含水量55％，起始pH自然，發(fā)酵溫度30℃，相對(duì)濕度70％。
　　 5.對(duì)藥性基質(zhì)和靈芪菌質(zhì)的HPLC分析表明：藥性基質(zhì)經(jīng)過(guò)發(fā)酵后其成分發(fā)生了明

4、顯變化。
　　 6.優(yōu)化得到靈芪菌質(zhì)多糖提取的最佳條件為：提取溫度90℃，提取時(shí)間100min，料液比1:20，提取3次，沉淀多糖添加乙醇終濃度至75％；優(yōu)化得到靈芪菌質(zhì)皂甙提取的最佳條件為：提取液乙醇濃度80％，料液比1:25，提取時(shí)間120min，提取2次。優(yōu)化后的靈芪菌質(zhì)多糖和皂甙得率分別為59.78 mg/g和1.14mg/g。
　　 7.比較黃芪與靈芝發(fā)酵前后不同提取液對(duì)CEF單層的最大安全濃度，表明各提取液對(duì)

5、CEF單層的安全濃度均變大，不同靈芪菌質(zhì)不同提取液的最大安全濃度差別不顯著。黃芪和菌質(zhì)提取液最大安全濃度分別為：水提液50和200μg·mL-1，多糖溶液800和1600μg·mL-1，醇提液20和100μg·mL-1。
　　 8.比較黃芪和靈芪菌質(zhì)不同提取液對(duì)禽流感減毒病毒的抑制效果，其中靈芪菌質(zhì)水提液對(duì)病毒的抑制率最大。比較不同加入方式對(duì)病毒抑制作用，以先加提取液后感染病毒的抑制效果最佳。以黃芪含量50％的靈芪菌質(zhì)C水提液對(duì)