表觀因子EZH2在肝癌治療中和糖蛋白gp130在HBV相關(guān)肝癌發(fā)展中的作用和分子機制.pdf

1、第一部分:索拉菲尼通過加速EZH2的降解抑制肝細胞生長和存活Enhancer ofzeste homolog2(EZH2)是哺乳動物的組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶(histonemethyltransferase，HMT)，可以通過催化組蛋白H3K27me3修飾的形成表觀沉默靶基因的表達，進而調(diào)控癌細胞的生長和存活。EZH2在肝癌中過量表達，然而在臨床治療中的意義仍不明了。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)多激酶抑制劑索拉菲尼(Sorafenib)在晚期肝癌病人的臨床治療

2、中具有生存優(yōu)勢，被認為是晚期肝癌治療的一線藥物。在我們的研究中，發(fā)現(xiàn)在肝細胞中索拉菲尼可以通過加速蛋白酶體的降解導(dǎo)致EZH2蛋白水平的減少，從而減少EZH2和H3K27me3在靶基因啟動子區(qū)的招募，引起肝細胞表觀基因組的改變。在肝細胞中體外過量表達的EZH2可以逆轉(zhuǎn)了索拉菲尼誘導(dǎo)的細胞生長抑制，細胞周期進展抑制和細胞凋亡，而且這一作用是依賴于EZH2的組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶活性。更重要的是，shRNA調(diào)控的EZH2的沉默或者用小分子抑制劑3

3、-deazaneplanocin A(DZNep)引起的EZH2活性抑制可以增強索拉菲尼誘導(dǎo)的肝細胞生長抑制和凋亡的作用。這些結(jié)果揭示了一個新的機制:即索拉菲尼可以通過加速EZH2的降解引起肝細胞表觀基因組的改變，進而抑制肝細胞的生長和存活，shRNA沉默或者藥物抑制EZH2使得肝細胞對索拉菲尼更敏感，從而為我們進一步探索新的針對肝癌晚期病人的聯(lián)合療法構(gòu)建了良好的框架。
　　第二部分:乙型肝炎病毒的感染通過抑制gp130蛋白的降解

4、促進肝癌的進展
　　大多數(shù)肝癌都是在經(jīng)過長期炎癥誘發(fā)成肝硬化的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的，由此可見炎癥在肝癌發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。雖然在腫瘤相關(guān)的炎癥中炎癥因子和腫瘤細胞表面受體的關(guān)鍵作用一再被證實，但對腫瘤細胞上受體的異常調(diào)控研究甚少。我們的研究發(fā)現(xiàn)在肝癌細胞中乙型肝炎病毒的感染可以導(dǎo)致內(nèi)源的促炎癥因子家族受體gp130蛋白水平的增加，而且這種作用主要是通過乙肝病毒X蛋白來發(fā)揮的。HBx蛋白并不能直接在轉(zhuǎn)錄水平增加gp130的合

5、成，而是抑制了gp130蛋白的降解。穩(wěn)定表達HBx蛋白可以通過增加gp130的穩(wěn)定性從而在體外促進細胞的增殖，誘導(dǎo)G1-S細胞周期進展和抑制細胞凋亡。而且我們在裸鼠的異種移植模型中也驗證了HBx的穩(wěn)定表達可促進gp130穩(wěn)定性增加這一結(jié)論。此外，我們還在肝癌病人樣品中發(fā)現(xiàn)高表達的gp130與HBs抗原的存在、微衛(wèi)星結(jié)節(jié)的存在、肝硬化的發(fā)生、高級別的腫瘤狀態(tài)和轉(zhuǎn)移等因素正相關(guān)。我們的結(jié)果揭示了HBx蛋白的一個新的功能:即病毒蛋白HBx可以

6、通過抑制gp130蛋白的降解來促進腫瘤進展，從而為調(diào)控HBV相關(guān)肝癌發(fā)生發(fā)展提供了一個新的分子機制。
　　第三部分:多聚梳家族蛋白EZH2調(diào)控的癌基因活性在腫瘤進展和復(fù)發(fā)中的作用
　　表觀調(diào)控因子是腫瘤治療中的新一類靶向分子。EZH2是多聚梳抑制復(fù)合物2的一個亞基，通過其組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶活性沉默基因的表達，從而在多種生物學(xué)過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。在很多腫瘤組織中發(fā)現(xiàn)EZH2的過量表達，而且發(fā)現(xiàn)過量表達的EZH2與惡性進展、差

7、的預(yù)后和復(fù)發(fā)密切相關(guān)。除此之外，EZH2在去勢抗性的前列腺癌中的癌基因活性是非多聚梳抑制復(fù)合物依賴的。因此，靶向EZH2表達或活性，或者在轉(zhuǎn)移的激素耐受的前列腺癌中靶向EZH2的非PRC2的功能可能是將來治療腫瘤和抑制復(fù)發(fā)的有效策略。在這篇綜述中，我們首先總結(jié)了已有的關(guān)于EZH2和下游的靶基因的調(diào)控的分子機制和功能的研究，然后闡述了EZH2和下游信號通路在腫瘤進展和復(fù)發(fā)中的作用機制和治療意義，并且歸納總結(jié)了已開展的對其針對性的靶向治療藥