IL-22在肝癌中的作用及微波和手術(shù)治療肝癌的對(duì)照研究.pdf

1、研究背景：
　　研究一
　　乙肝病毒感染所產(chǎn)生的炎癥及免疫反應(yīng)是引起肝細(xì)胞癌(HCC)發(fā)生發(fā)展的重要原因。最近有研究表明白介素22(IL-22)在肝病中產(chǎn)生保護(hù)性與致病性雙重作用。對(duì)于肝臟腫瘤而言，分別有研究顯示IL-22可以促進(jìn)肝癌的形成與轉(zhuǎn)移，以及血清IL-22水平與肝癌患者的預(yù)后負(fù)相關(guān)。但是，到目前為止，還未有慢乙肝(CHB)至不典型增生(AH)以及肝癌連續(xù)發(fā)展過程中該因子變化情況的報(bào)道。因此，本研究中我們嘗試明確IL

2、-22在乙肝病毒感染至肝癌發(fā)生和發(fā)展中的作用，明確組織IL-22水平與肝癌預(yù)后的關(guān)系，并在此基礎(chǔ)上探討IL-22作為肝癌治療靶標(biāo)的可行性。
　　研究二
　　對(duì)于符合米蘭標(biāo)準(zhǔn)的肝癌來說，治療方案仍存在爭(zhēng)議，目前手術(shù)切除作為一線的治療方式已經(jīng)被廣泛接受。最近由于微波技術(shù)的進(jìn)步，微波消融受到越來越多的關(guān)注。然而，目前對(duì)微波消融與手術(shù)切除進(jìn)行系統(tǒng)對(duì)比的文章未見報(bào)道。因此，我們?yōu)榱吮容^二種方式治療符合米蘭標(biāo)準(zhǔn)小肝癌的有效性與安全性而實(shí)

3、施了此研究。
　　研究目的:
　　研究一
　　1.明確慢乙肝進(jìn)展為肝癌的過程肝臟組織中IL-22+T細(xì)胞及血漿中IL-22所起的作用。2.體外模擬肝癌微環(huán)境探究IL-22對(duì)肝癌細(xì)胞系增殖及凋亡的影響。
　　研究二
　　比較微波消融與手術(shù)切除治療符合米蘭標(biāo)準(zhǔn)小肝癌的有效性與安全性，為臨床選擇合理的治療方式提供理論依據(jù)。
　　研究方法:
　　研究一
　　1.免疫組化檢測(cè)46例慢乙肝、37例不典

4、型增生、53例肝癌肝穿標(biāo)本以及56例成對(duì)肝癌與癌旁手術(shù)標(biāo)本中肝臟局部IL-22+T細(xì)胞及CD8+T細(xì)胞的表達(dá)情況，明確腫瘤組織內(nèi)IL-22+T細(xì)胞及CD8+T細(xì)胞與臨床病理因素之間的關(guān)系以及對(duì)肝癌患者預(yù)后的影響。2.通過ELISA法檢測(cè)各組患者血漿中IL-22的表達(dá)情況，明確肝癌患者血漿IL-22與臨床病理因素之間的關(guān)系以及對(duì)預(yù)后的影響。3.體外培養(yǎng)肝癌細(xì)胞系SMMC-7721，通過CCK-8和BrdU/DAPI免疫熒光檢測(cè)IL-22對(duì)

5、于肝癌細(xì)胞增殖的影響;采用Hoechst33342/PI免疫熒光和Cell-IQ無標(biāo)記活細(xì)胞影像分析系統(tǒng)檢測(cè)IL-22對(duì)肝癌細(xì)胞凋亡的影響。
　　研究二
　　選取我院確診的肝細(xì)胞癌患者224人，其中采用微波消融治療的患者117入，使用手術(shù)切除治療的患者107人，完善隨訪資料進(jìn)行回顧性研究。對(duì)比兩組患者總體生存率與無瘤生存率，進(jìn)一步比較兩組患者復(fù)發(fā)情況，比較兩組患者的并發(fā)癥。根據(jù)腫瘤直徑與數(shù)目將入組病人分成單發(fā)肝癌直徑≤3cm

6、、單發(fā)肝癌直徑3-5cm和多發(fā)肝癌直徑＜3cm三個(gè)亞組，分析兩種治療方式對(duì)不同亞組病人生存期的影響。
　　結(jié)果:
　　研究一
　　1.免疫組化結(jié)果顯示:在肝穿標(biāo)本中，從慢乙肝、不典型增生至肝癌發(fā)生過程中患者肝組織中的IL-22+T細(xì)胞密度逐步增加(CHB vs AH，P=0.002; AH vsHCC，P=0.010);在手術(shù)標(biāo)本中，腫瘤浸潤(rùn)IL-22+T細(xì)胞密度隨著腫瘤惡性程度的增加而升高（高分化vs中分化，P=0.

7、007;中分化vs低分化，P=0.008），但高于相應(yīng)癌旁組織;腫瘤組織內(nèi)IL-22+T細(xì)胞密度是影響患者預(yù)后的獨(dú)立因素。2.ELISA結(jié)果顯示:從慢乙肝、不典型增生至肝癌發(fā)生過程中患者血漿IL-22水平逐漸升高(CHB vs AH，P=0.024; AH vs HCC，P=0.026);在肝癌患者中，血漿IL-22水平與肝癌分化程度存在相關(guān)性(P=0.033);血漿IL-22水平是影響患者預(yù)后的獨(dú)立因素。3.體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)顯示:1-10

8、 ng/mL的重組體IL-22可以促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖，但不同濃度的重組體IL-22并不能抑制肝癌細(xì)胞凋亡。
　　研究二
　　對(duì)于符合米蘭標(biāo)準(zhǔn)的肝癌患者而言，微波組與手術(shù)組在總體生存率上無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.513)，手術(shù)組無瘤生存率高于微波組(P=0.005)。對(duì)于單發(fā)肝癌直徑≤3cm的病人而言二組在總體生存與無瘤生存上無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.577，P=0.140)。對(duì)單發(fā)肝癌直徑3-5cm的病人而言總體生存無明顯差異(P=0

9、.820)，手術(shù)組的無瘤生存要高于微波組(P=0.014)。對(duì)于多發(fā)肝癌直徑＜3cm的病人而言二組在總體生存與無瘤生存均無明顯差異(P=0.702，P=0.327)。
　　結(jié)論:
　　研究一
　　1.肝臟微環(huán)境中IL-22+T細(xì)胞促進(jìn)肝癌的發(fā)生與發(fā)展，腫瘤組織浸潤(rùn)的IL-22+T細(xì)胞高者預(yù)后差。2.血漿IL-22促進(jìn)肝癌的發(fā)生與發(fā)展，血漿IL-22水平高的患者預(yù)后差。3.一定濃度范圍的IL-22可以促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖，但