葛根異黃酮的發(fā)酵提取工藝及其抗氧化性研究.pdf

1、葛根為豆科葛屬植物野葛（Pueraria lobata（Wild.）Ohwi）的根，屬于“藥食同源”植物，主要成分為纖維素、淀粉、異黃酮類化合物以及豐富的礦質元素等，其中葛根異黃酮（Radix pueraria isoflavones，RPI）為其主要功能性成分。RPI是一類植物雌激素，具有改善心腦血管代謝機能、抗衰老、抗癌、抗疲勞、抗氧化、增強機體免疫力以及解酒保肝等多種功能。葛根素（Puerarin）占RPI總量的50％以上，常被用

2、作評價葛根品質的指標，并已廣泛用于臨床。本文考察了HPLC測定發(fā)酵液中葛根素的方法；以葛根為培養(yǎng)基主要原料，篩選適合發(fā)酵法提取RPI的菌種，優(yōu)化了培養(yǎng)基組分及培養(yǎng)條件；采用大孔樹脂對發(fā)酵產物進行純化，比較了不同提取方法所得RPI的抗氧化活性。研究結果如下：
　　 1、對HPLC測定發(fā)酵液中葛根素含量的方法進行考察，結果表明此法穩(wěn)定性好，精密度和加標回收率均較高，葛根素含量在40～200μg/mL之間線性相關（R2=0.9996）

3、，適用于發(fā)酵液中葛根素含量的測定。
　　 2、以葛根素提取量為指標，篩選后確定米根霉-酵母混合菌為最適發(fā)酵菌種；采用Plackett-Burman試驗分析液料比、氮源和無機鹽等因素對RPI產量的影響，其中液料比、蛋白胨和KH2PO4具有顯著正效應，通過響應面試驗對其進行水平優(yōu)化。結果表明，液料比30:1、蛋白胨8.49g/L、KH2PO46.89g/L時，RPI和葛根素提取量分別可達到31.98和16.18 mg/g·DW。

4、r>　　 3、考察了糖化溫度、后發(fā)酵溫度、培養(yǎng)基初始pH、接種比例、裝液量等因素對RPI提取量的影響；在單因素試驗的基礎上，以RPI為指標，采用響應面試驗設計，對培養(yǎng)基初始pH、裝液量和糖化溫度進行了優(yōu)化，得到最佳培養(yǎng)條件為：初始pH6.88、裝液量80 mL、糖化溫度36.2℃、后發(fā)酵溫度28℃、接種比例6％：6％，在此條件下RPI和葛根素提取量分別可達到40.29和18.36 mg/g·DW。
　　 4、比較了不同極性大孔