TGF-β3緩釋組織工程滑膜鞘的研制-.pdf

1、一、研究背景：
　　屈指肌腱損傷后愈合發(fā)生粘連常常導(dǎo)致手指的關(guān)節(jié)活動受限,目前仍是手外科術(shù)后常見的并發(fā)癥,往往需要再次手術(shù)治療。盡管隨著材料和手術(shù)技術(shù)、康復(fù)手段的進(jìn)步,如何減少肌腱損傷愈合后粘連仍然面臨挑戰(zhàn)。研究發(fā)現(xiàn)有滑膜鞘肌腱在抗粘連方面明顯優(yōu)于無滑膜鞘肌腱,滑膜鞘通過分泌滑液給肌腱提供營養(yǎng),同時通過自身分泌的細(xì)胞因子來減少瘢痕形成,但其數(shù)量少、取材會對局部組織造成損傷,如果使用人工肌腱也面臨著免疫排斥反應(yīng)等問題。如果我們對無滑

2、膜鞘或滑膜鞘損傷的肌腱給予人工化改造,制備組織工程滑膜鞘,將有可能大大減少肌腱損傷愈合后粘連問題。
　　近年來,轉(zhuǎn)化生長因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)家族在瘢痕形成過程中的作用被越來越重視,TGF-β被認(rèn)為是肌腱損傷后粘連、瘢痕形成的關(guān)鍵因子。研究發(fā)現(xiàn)在皮膚損傷愈合過程中,加入轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β1,2的中和抗體或增加TGF-β3的量能有效減少瘢痕的形成。TGF-β3在減少瘢痕形

3、成的治療中被認(rèn)為是有效和可行的。
　　殼聚糖是幾丁質(zhì)部分脫乙?；漠a(chǎn)物,在自然界中廣泛存在,殼聚糖溶液中帶有高密度的正電荷,可以與多種水溶性的陰離子物質(zhì)結(jié)合,并可以用來制備殼聚糖微球、纖維和多孔支架。殼聚糖具有良好的生物相容性和生物可降解性,在體內(nèi)可被溶菌酶等酶解成低聚糖,降解產(chǎn)物能被生物體完全吸收。
　　本研究擬利用殼聚糖微球負(fù)載TGF-b3,構(gòu)建負(fù)載緩釋TGF-b3微球的殼聚糖組織工程支架,然后種植滑膜細(xì)胞,構(gòu)建TGF-

4、b3緩釋組織工程滑膜鞘,并檢測其生物相容性。本研究將為肌腱粘連的防治提供新的理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ),將可能為臨床手外科屈指肌腱粘連的防治提供有效的方法。
　　二、研究目的：
　　通過制備負(fù)載轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGF-β3)的緩釋組織工程滑膜鞘,探索減少肌腱損傷愈合后粘連的新方法。
　　三、研究內(nèi)容：
　　1.采用乳化交聯(lián)法制備負(fù)載TGF-β3的殼聚糖緩釋微球,掃描電鏡觀察并檢測其體外緩釋效果。
　　2.利用冷凍

5、干燥法制備殼聚糖三維支架,將殼聚糖微球引入支架,掃面電鏡觀察。3.將滑膜細(xì)胞收集后種植于含TGF-β3微球的殼聚糖三維支架,MTT法檢測微
　　球和支架材料對滑膜細(xì)胞增殖的影響,檢驗(yàn)材料和細(xì)胞的體外相容性。
　　四、結(jié)果：
　　1.殼聚糖微球掃描電鏡下觀察呈球狀,平均粒徑28.5±4.3μm。
　　2.對微球緩慢釋放TGF-b3進(jìn)行連續(xù)監(jiān)測7天,累積總釋放率為46.2％±0.3%。
　　3.殼聚糖三維支架掃

6、面電鏡觀察孔隙較為一致,孔隙直徑平均180.4±35.3μm,孔隙率83.2%±0.6%。微球可均勻擴(kuò)散并嵌入到支架中。
　　4.滑膜細(xì)胞在支架和微球間生長良好。MTT法檢測TGF-β3微球和支架不影響滑膜細(xì)胞正常生長增殖,材料體外相容性較好(p>0.05)。
　　五、結(jié)論：
　　本研究驗(yàn)證了負(fù)載TGF-β3的微球體外緩釋效果良好,材料和滑膜細(xì)胞具有良好的生物相容性,組織工程滑膜鞘為減少肌腱損傷愈合后粘連提供了新方法。