大鼠氣管干細胞的定位研究.pdf

1、目的：實驗?zāi)康母杉毎蔷哂凶晕腋?、高度增殖和多向分化潛能的細胞群體,這些細胞可以通過細胞分裂維持自身細胞群的大小,同時又可以進一步分化成各種不同的組織細胞,從而構(gòu)成機體各種復(fù)雜的組織器官.按照組織發(fā)生學(xué)來源,干細胞可以分為胚胎干細胞和成體干細胞,成體干細胞是指存在于一種已經(jīng)分化組織中的未分化細胞,這種細胞能夠自我更新并且形成該類型組織的細胞,在病理狀態(tài)或外因誘導(dǎo)下表現(xiàn)出不同程度的再生和更新能力.近年來,科學(xué)家陸續(xù)證明和分離了骨髓、神經(jīng)

2、細胞、肝細胞、胃腸道、皮膚等組織器官干細胞,但氣管干細胞的定位及分離尚未解決,雖然陸續(xù)有一些相關(guān)的標記物,但其特異性不高,因而對干細胞研究從其功能上入手則更為科學(xué),即干細胞的自我更新多向分化的能力入手.近年有人進行肝臟干細胞的定位,使用藥物或大面積切除造成肝臟極重度的損傷,觀察到卵圓細胞及小圓細胞的出現(xiàn)(認為是肝臟干細胞),這提示我們干細胞在某些特殊的非常事件才能觀察到,也就是說可能只有在氣管大面積損傷的基礎(chǔ)上才能觀察到其干細胞的存在,

3、該研究擬尋找適當?shù)哪Ｐ驮谠挥^察氣管干細胞在損傷修復(fù)中的作用,進行氣管干細胞的定位研究.5-FU為抗嘧啶類代謝藥,屬于代謝周期性特異的藥物,該實驗使用5-FU造成氣管粘膜中處于增殖期的細胞變性、壞死、脫落,基底膜上僅殘留處在G0期的少量零散分布的裸核樣的細胞,其中包括氣管干細胞,并在此基礎(chǔ)上觀察上皮修復(fù)的過程,制成特殊的氣管損傷修復(fù)模型,用于氣管于細胞的定位及為研究其分化奠定基礎(chǔ).結(jié)論1.首次使用5-FU建立氣管干細胞體外實驗?zāi)Ｐ?動態(tài)

4、觀察了氣管上皮的損傷及干細胞修復(fù)上皮的過程.2.觀察到大鼠氣管上皮G0期細胞在氣管損傷修復(fù)過程中的作用,首次證明氣管干細胞存在于5-FU抗性的G0期細胞中.3.首次使用熒光染料Hoechst33342觀察大鼠氣管干細胞的性狀,氣管上皮干細胞能夠表達ABCG2/Bcrp1.總之,大鼠氣管干細胞定位于具有5-FU抗性的G0期細胞,此種細胞能夠排出熒光染料Hoechst33342的能力,及表達基因ABCG2/Bcrp1的性狀,具有多向分化能力