腹腔內(nèi)連續(xù)應(yīng)用NGF對(duì)周圍神經(jīng)損傷后軸漿運(yùn)輸恢復(fù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討周圍神經(jīng)損傷后,應(yīng)用神經(jīng)再生室橋接神經(jīng),腹腔內(nèi)連續(xù)注射神經(jīng)生長(zhǎng)因子(nerve growth factor,NGF),利用生物素葡聚糖胺(biotin dextran amine,BAD)神經(jīng)示蹤觀察其對(duì)軸漿運(yùn)輸功能的恢復(fù)作用。
　　方法:將26只成年Sprague-Dawley大白鼠隨機(jī)分為3組:A組12只,為實(shí)驗(yàn)組;B組12只,為空白對(duì)照組;C組2只,為正常組。A、B組大白鼠雙側(cè)坐骨神經(jīng)切除3mm形成缺損,用醫(yī)用硅膠

2、管橋接形成神經(jīng)再生室。A、B組大白鼠手術(shù)時(shí)分別向神經(jīng)再生室內(nèi)注射NGF 0.04ml(40Au)和等量生理鹽水,左右各半。術(shù)后每隔3天腹腔內(nèi)分別注入等量NGF和生理鹽水。術(shù)后觀察兩組大鼠足部潰瘍及愈合情況。第2、4、6、8周顯露坐骨神經(jīng),觀察局部情況,將坐骨神經(jīng)遠(yuǎn)端距橋接點(diǎn)5mm處結(jié)扎,近端距吻合處5mm注射10％BAD 1μL。18小時(shí)后再次麻醉,升主動(dòng)脈插管灌注固定處死。將坐骨神經(jīng)取出后以多聚甲醛溶液固定,蔗糖溶液沉底。切取橋接處和

3、結(jié)扎點(diǎn)近側(cè)各3mm神經(jīng)標(biāo)本。C組大白鼠的雙側(cè)坐骨神經(jīng)遠(yuǎn)端距坐骨結(jié)節(jié)18mm處結(jié)扎,按照以上方法,在距坐骨結(jié)節(jié)5mm處注射10%BAD 1μL,18小時(shí)后獲取結(jié)扎點(diǎn)近側(cè)5mm神經(jīng)標(biāo)本。標(biāo)本快速冰凍切片,行HE染色和神經(jīng)示蹤顯色檢測(cè)。分析A、B組的神經(jīng)再生情況及軸漿運(yùn)輸功能恢復(fù)情況,有無顯著性差異。
　　結(jié)果:在第2、4、6、8周各個(gè)時(shí)間段實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組患肢足趾紅腫程度輕、局部潰爛及足趾脫落少、潰瘍面愈合快;神經(jīng)再生室周圍組織血管網(wǎng)豐

4、富、再生神經(jīng)粗大、表面光滑、彈性好、較早到達(dá)遠(yuǎn)端、與遠(yuǎn)端神經(jīng)連接緊密;遠(yuǎn)端神經(jīng)腫脹輕、腫脹減輕快。組織切片HE染色見兩組神經(jīng)均隨時(shí)間延長(zhǎng)神經(jīng)纖維數(shù)目增加。實(shí)驗(yàn)組橋接處再生神經(jīng)纖維數(shù)目多、直徑粗、髓鞘厚、粗細(xì)均勻,較對(duì)照組明顯,有顯著性差異(P<0.05)。BDA神經(jīng)示蹤切片見術(shù)后第2、4周兩組橋接處及遠(yuǎn)端神經(jīng)均未見陽性標(biāo)記神經(jīng)纖維;術(shù)后第6周實(shí)驗(yàn)組橋接處神經(jīng)可見陽性標(biāo)記神經(jīng)纖維,對(duì)照組橋接處神經(jīng)及兩組遠(yuǎn)端神經(jīng)均未見陽性標(biāo)記神經(jīng)纖維;術(shù)后