腺病毒介導(dǎo)CD154胞外區(qū)基因轉(zhuǎn)染對(duì)大鼠同種異體腎移植存活的影響.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:該實(shí)驗(yàn)選擇T細(xì)胞共刺激信號(hào)CD40—CD154通路的阻斷劑——重組人CD154胞外區(qū)(Extracellular Domain)為免疫調(diào)節(jié)劑.將其基因插入復(fù)制缺陷型腺病毒這一安全、高效的基因轉(zhuǎn)染載體,構(gòu)建人CD154胞外區(qū)(hCD154ED)基因重組的復(fù)制缺陷型腺病毒,通過(guò)這一重組載體將人CD154胞外區(qū)基因?qū)氪笫竽I臟移植物,探討以hCD154ED基因修飾移植腎的方法在延長(zhǎng)移植腎存活中的作用.結(jié)果和結(jié)論:一、感染ADEasy-s

2、hCD154ED-1RES2-EGFP復(fù)制缺陷型腺病毒的PK-15細(xì)胞對(duì)混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)的抑制作用 感染ADEasy-shCD154ED-IRES2-EGFP腺病毒的PK-15細(xì)胞在MOI(平均感染強(qiáng)度)為1和10時(shí),可以明顯抑制抑制人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PMBC)增殖能力,相對(duì)于對(duì)照組p<0.05.但是在MOI為0.1、0.01、0.001三組中對(duì)PMBC的抑制能力沒(méi)有顯著差異,提示如果在體內(nèi)轉(zhuǎn)染效率低于一定程度,該基因治療將起不到預(yù)期

3、的作用.二、hCD154ED基因局部轉(zhuǎn)染對(duì)移植腎存活的影響 以優(yōu)化的ADEasy-shCD154ED-IRES2-EGFP轉(zhuǎn)染供體腎臟的方法明顯延長(zhǎng)了同種異體大鼠腎臟移植物的存活時(shí)間.用ADEasy-shCD154ED-IRES2-EGFP轉(zhuǎn)染的BN大鼠(近交系)供腎移植給Lewis大鼠(近交系)后,供腎的存活時(shí)間較對(duì)照組明顯延長(zhǎng)((33.625±3.38d vs 9.625±1.061d,p<0.01));組織學(xué)檢查顯示該組移植腎Ba

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