8-烷基小檗堿同系物的合成與藥理活性.pdf

1、小檗堿屬異喹啉類生物堿,為黃連等傳統(tǒng)中藥的主要活性成分,在臨床上被廣泛用于治療細菌感染引起的胃腸道疾病?，F(xiàn)代科學研究顯示,小檗堿不但具有良好的體內(nèi)外抗菌作用,而且還表現(xiàn)出很好的調脂,降血糖,抗腫瘤,降血壓,抗傳染性原蟲和抗心率失常等多種藥理活性。本實驗以小檗堿為先導化合物,通過在小檗堿分子C8位引入直鏈烷基的方法制備了不同碳鏈取代的8-烷基小檗堿同系物(Ber-C8-n,n=2,4,6,8,10,12,16),并采用相應的實驗方法研究了

2、Ber-C8-n的體外抗菌活性,體內(nèi)調脂活性和體內(nèi)毒性。實驗方法與結果如下:
　　 1.8-烷基小檗堿同系物的合成與鑒定采用格氏試劑引入烷基的方法進行中間體8-烷基二氫小檗堿的合成,研究了反應溶劑(乙醚,二氧六環(huán)和四氫呋喃)對中間體8-烷基二氫小檗堿合成產(chǎn)率的影響。結果發(fā)現(xiàn)以THF為反應溶劑時中間體的合成產(chǎn)率最高,與乙醚比較產(chǎn)率提高近4倍,最后以THF為溶劑順利制備了不同碳數(shù)烷基特別是長鏈烷基取代的Ber-C8-n。合成化合物的

3、分子結構分別通過元素分析,UV,IR,1HNMR.和13CNMR等方法進行了確認。
　　 2.8-烷基小檗堿同系物的體外抗菌活性抑菌圈法研究了18種微生物(包括G+菌,G-菌和真菌)對Ber-C8-n的敏感性,并采用比濁法測定了6種敏感微生物的MIC值。實驗結果顯示,G+菌對Ber-C8-n敏感性明顯強于G-菌和真菌；Ber-C8-n的抗菌活性規(guī)律為:在小檗堿C8位接入烷基后抗菌活性隨烷基碳數(shù)的增加而提高,但當烷基碳數(shù)>8時,B

4、er-C8-n的抗菌活性則隨烷基碳數(shù)的增加而下降,即8-辛基小檗堿(Ber-C8-8)在同系物中表現(xiàn)出最高抗菌活性。
　　 3.8-烷基小檗堿同系物的抗菌活性差異的機理分別以兔血紅細胞及細胞膜,枯草桿菌和大腸桿菌完整細胞為實驗材料,采用比色法和熒光分析方法研究了Ber-C8-n對兔血紅細胞的溶血作用,Ber-Cg-n對兔血紅細胞膜和完整細菌細胞膜流動性以及Ber-C8-n對膜蛋白或菌體蛋白熒光的淬滅作用。
　　 實驗結果

5、表明,抗菌活性越大的Ber-C8-n,其溶血作用越大:抗菌活性越大的Ber-C8-n,對細胞膜流動性的干擾作用和膜蛋白或菌體蛋白熒光的淬滅作用也越強。如在所有同系物中抗菌活性最強的Bet-C8-8和Bet-C8-6在紅細胞溶血能力,細胞膜流動性的干擾能力和對膜蛋白或菌體蛋白熒光的淬滅能力上均表現(xiàn)為最強。定量分析與比較Ber-C8-n對枯草桿菌(G+菌)和大腸桿菌(G-菌)完整細菌細胞膜及菌體蛋白的影響作用發(fā)現(xiàn),相同Ber-C8-n對枯草

6、桿菌(G+菌)細胞膜流動性的影響能力遠大于對大腸桿菌(G-菌)膜流動性的影響能力,但對兩類細菌完整細胞蛋白的熒光淬滅作用無明顯差異。
　　 4.8-烷基小檗堿同系物的體內(nèi)調脂活性實驗性高脂血癥大鼠為動物模型,對Ber-C8-n的調脂活性及興趣分子8-十六烷基小檗堿調脂作用的劑量效應進行了研究。
　　 實驗結果表明,接入親脂性烷基有利于8-烷基小檗堿同系物體內(nèi)調脂活性的發(fā)揮。長鏈烷基化合物8-月桂基小檗堿和8-十六烷基小檗

7、堿的調脂活性高于小檗堿和其他8-烷基小檗堿同系物。與鹽酸小檗堿比較,對高脂血癥實驗大鼠TC均值的下調能力分別提高了83％和97％,其它相關血清指標亦有明顯改善趨勢。劑量效應實驗結果表明,8-十六烷基小檗堿能劑量依賴性的降低高脂血癥實驗大鼠血清TC和TG含量,減少腹腔脂肪和肝臟脂肪的積累,提高血清HDL-C含量,并能有效改善高脂血癥實驗大鼠的動脈硬化指數(shù),食物利用率等相關病理指標。
　　 5.8-烷基小檗堿同系物的體內(nèi)毒性昆明種小

8、鼠為實驗動物模型,采用改良寇氏法測定了8-烷基小檗堿同系物的LD50值,并以SD大鼠為實驗動物,經(jīng)口125mg/kg.bw劑量處理6周,對興趣分子8-辛基小檗堿,8-月桂基小檗堿和8-十六烷基小檗堿的肝腎毒性進行了初步評價。
　　 實驗結果表明,接入短鏈烷基后8-烷基小檗堿同系物的LD50值與其先導化合物鹽酸小檗堿比較大幅度減小,即毒性大幅增加。但隨著接入烷基碳數(shù)的增加,8-烷基同系物的LD50值隨之增加,即毒性逐步下降。興趣分