泛素蛋白酶體制M劑MG-132對幼鼠高氧肺損傷細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的：
　　 在危重兒童尤其是新生兒的救治過程中，常需要長時間吸入高濃度氧(簡稱高氧)，但是長時間吸入高氧后，可導(dǎo)致急性肺損傷。引起高氧肺損傷的機(jī)制很多，目前認(rèn)為凋亡在高氧肺損傷的發(fā)病過程中具有十分重要的作用。泛素-蛋白酶體途徑(UPP)是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)選擇性降解的重要途徑，參與細(xì)胞的多種生理活動過程，比如凋亡等。蛋白酶體抑制劑MG-132，可以阻斷UPP，早期的研究將其用于抑制腫瘤生長、抑制心肌缺血再灌注損傷等。目前還沒有將MG

2、-132用于高氧肺損傷防治的研究報告。
　　 本研究通過高氧肺損傷大鼠模型，觀察UPP在高氧肺損傷過程中所起作用，觀察蛋白酶體抑制劑MG-132對肺損傷和凋亡的影響及其機(jī)制，旨在探討高氧肺損傷發(fā)病機(jī)制，以期找到一種新的確切的早期干預(yù)、治療高氧肺損傷的方法。
　　 方法：
　　 1.建立高氧肺損傷大鼠模型：大鼠常壓下持續(xù)吸入高濃度氧(FiO2950ml/L)72小時。
　　 2.將26只幼年SD大鼠隨機(jī)分為

3、四組：
　　 ①空氣對照組(n=5)；
　　 ②高氧組(n=8)；
　　 ③高氧加蛋白酶體抑制劑組(n=8)(腹腔內(nèi)注射MG-132，0.5mg/kg，qd×3)；
　　 ④空氣加蛋白酶體抑制劑組(n=5)(腹腔內(nèi)注射MG-132，0.5mg/kg，qd×3)。
　　 3.觀察大鼠肺損傷形態(tài)學(xué)改變，進(jìn)行肺組織大體病理分級及肺損傷病理評分。
　　 4.根據(jù)TUNEL法計算肺組織凋亡指數(shù)。

4、r>　　 5.檢測肺臟細(xì)胞中泛素化蛋白的表達(dá)。
　　 6.檢測肺臟細(xì)胞中Bcl-2類蛋白、Bax類蛋白和P38 MAPK的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.成功復(fù)制了高氧肺損傷大鼠模型。
　　 2.高氧組大體病理分級和肺損傷病理評分結(jié)果均提示肺損傷較空氣組及空氣加蛋白酶體抑制劑組嚴(yán)重(均P<0.01)；而高氧加蛋白酶體抑制劑組大體病理分級和肺損傷病理評分結(jié)果提示肺損傷較高氧組減輕(均P<0.01)。

5、>　　 3.高氧組泛素化蛋白的表達(dá)較空氣組強，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，高氧加蛋白酶體抑制劑組泛素化蛋白的表達(dá)與高氧組比較更強，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　 4.高氧組凋亡指數(shù)與空氣組及空氣加蛋白酶體抑制劑組相比，明顯增高，有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01)。高氧加蛋白酶體抑制劑組與高氧組相比，凋亡指數(shù)，明顯降低，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
　　 5.凋亡調(diào)控蛋白及途徑的檢測：P38蛋白的表達(dá)在空氣

6、組中較弱，在高氧組中表達(dá)較強，與空氣組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，但高氧加蛋白酶體抑制劑組P38蛋白的表達(dá)與高氧組比較明顯減少，與高氧組相比有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。Bcl-2與Bax蛋白在高氧組的表達(dá)都高于空氣對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(PBcl-2<0.05，PBax<0.01)。高氧組中Bax蛋白表達(dá)要高于高氧加蛋白酶體抑制劑組(P<0.01)，但Bcl-2蛋白的表達(dá)卻低于高氧加蛋白酶體抑制劑組(P<0.05)。Bcl

7、-2/Bax比值高氧加蛋白酶體抑制劑組比其他組高(均P<0.01)。在各檢測指標(biāo)中，空氣組和空氣加蛋白酶體抑制劑組相比，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.高氧暴露72小時大鼠肺臟有明顯損傷。
　　 2.高氧暴露早期激活了泛素蛋白酶途徑，其參與了肺損傷病理生理過程。
　　 3.蛋白酶體抑制劑MG-132可能通過Bcl-2/Bax蛋白和P38 MAPK通路而抑制細(xì)胞凋亡，從而減輕