溫郁金中四個(gè)倍半萜類化合物的抗炎機(jī)制研究.pdf

1、溫郁金為姜科姜黃屬(Curcuma)多年生草本植物溫郁金Curcuma wenyujin的干燥根莖，廣泛用于治療由血液循環(huán)障礙所引起的炎癥，如關(guān)節(jié)痛、痛經(jīng)等。在前期工作中，實(shí)驗(yàn)室從溫郁金中提取分離得到4個(gè)倍半萜類單體化合物，分別為(1) curcolide,(2)8,9-seco-4β-hydroxy-1α,5βH-7(11)-guaen-8,10-olide,(3)7β,βα-dihydroxy-1α,4αH-guai-10(15)-

2、en-5β,8β-endoxide,(4)zedoarondiol。本課題以LPS誘導(dǎo)小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞（RAW264.7）為模型研究這4個(gè)化合物的抗炎機(jī)制。
　　 噻唑藍(lán)比色法(MTT)表明化合物1-4在0.01-100.00μM濃度范圍內(nèi)，對RAW264.7無細(xì)胞毒作用。酶聯(lián)免疫法(ELISA)結(jié)果表明這些化合物對脂多糖誘發(fā)的TNF-α、IL-1β與IL-6水平升高具有抑制作用。Griess試劑檢測法顯示化合物1-4

3、均能降低細(xì)胞內(nèi)NO水平，活性氧(ROS)試劑盒檢測法發(fā)現(xiàn)化合物1-4對細(xì)胞內(nèi)ROS含量也有抑制作用。
　　 課題用ELISA檢測化合物對NF-κB與DNA結(jié)合活性的作用，結(jié)果表明化合物1-3能夠不同程度地抑制NF-κB與DNA結(jié)合活性，并且其抑制作用呈劑量依賴關(guān)系，而化合物4無此作用。免疫熒光染色觀察到化合物1-3能夠抑制NF-κB從細(xì)胞質(zhì)到細(xì)胞核的轉(zhuǎn)運(yùn)，蛋白印跡實(shí)驗(yàn)(Western blot)表明這3個(gè)化合物能夠下調(diào)細(xì)胞核內(nèi)N