GPC3對早期肝癌的鑒別診斷及經(jīng)典Wnt通路關(guān)系的探討.pdf

1、目的：
　　 比較GPC3、CD34及網(wǎng)狀纖維染色在肝各結(jié)節(jié)增生性病變中的鑒別診斷作用，并探討GPC3在HCC中作用機(jī)制與經(jīng)典Wnt/β-catenin信號傳導(dǎo)通路可能性關(guān)系。
　　 方法：
　　 應(yīng)用免疫組織化學(xué)(Elivision法)對23例血清AFP陰性高分化肝細(xì)胞癌(W-HCC)、16例高級別異型增生性結(jié)節(jié)(H-DN)、13例低級別異型增生性結(jié)節(jié)(L-DN)和25例局灶性結(jié)節(jié)狀增生(FNH)分別進(jìn)行GPC

2、3和CD34抗體標(biāo)記，并每例做網(wǎng)狀纖維特殊染色，分析在肝結(jié)節(jié)增生性病變中的鑒別診斷作用。并應(yīng)用組織芯片技術(shù)對上述23例W-HCC和50例進(jìn)展性肝細(xì)胞癌(A-HCC，包括;中分化肝細(xì)胞癌M-HCC和低分化肝細(xì)胞癌P-HCC各25例)分別進(jìn)行GPC3、β-catenin和CyclinDl抗體標(biāo)記，分析三者在HCC中表達(dá)的相關(guān)性和分別與臨床病理參數(shù)的關(guān)系。
　　 結(jié)果：
　　 1.GPC3的陽性表達(dá)率在血清AFP陰性W-HCC

3、和H-DN中分別為73.9％(17/23)和12.5％(2/16)，L-DN和FNH中無表達(dá)。GPC3在血清AFP陰性W-HCC中陽性表達(dá)率高于H-DN，組間表達(dá)具有顯著性差異（P＜0.05）。GPC3在血清AFP陰性W-HCC中癌旁組織中表達(dá)率為8.7％(2/23)，癌與癌旁組織表達(dá)具有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 2.CD34在血清AFP陰性W-HCC中表達(dá)模式有斑點(diǎn)狀、裂隙狀和環(huán)島狀，陽性表達(dá)率為60.9％(14/2

4、3)，陽性范圍大多在25％-100％;在H-DN和L-DN中的陽性表達(dá)率分別為18.8％(3/16)和23.1％(3/13)，陽性范圍大多在5％-25％;在FNH中的陽性表達(dá)率為0％(0/25)，組間表達(dá)具有顯著性差異（P＜0.05）。CD34在血清AFP陰性W-HCC中的陽性表達(dá)率高于H-DN、L-DN、FNH，組間表達(dá)具有顯著性差異（P＜0.05）。CD34在血清AFP陰性W-HCC中癌旁組織中表達(dá)率為26.1％(6/23)，癌與癌

5、旁組織表達(dá)具有顯著性差異（P＜0.05）。
　　 3.網(wǎng)狀纖維染色肝板＞3層細(xì)胞厚度陽性率在血清AFP陰性W-HCC和H-DN中分別為69.5％(16/23)和12.5％(2/16)，L-DN和FNH中無表達(dá)。網(wǎng)狀纖維染色在血清AFP陰性W-HCC中的陽性表達(dá)率高于H-DN，組間表達(dá)具有顯著性差異（P＜0.05)。網(wǎng)狀纖維染色在血清AFP陰性W-HCC中癌旁組織中表達(dá)率為17.4％(4/23)，癌與癌旁組織表達(dá)具有顯著性差異（P

6、＜0.05）。
　　 4.GPC3、CD34、網(wǎng)狀纖維染色對血清AFP陰性W-HCC的檢出率分別為73.9％、60.9％、69.5％;三指標(biāo)聯(lián)合的檢出率分別為91.3％。
　　 5.GPC3的陽性表達(dá)率在W-HCC、M-HCC、P-HCC中分別為73.9％(17/23)，88％(22/25)和96％(24/25)。GPC3在A-HCC中的陽性表達(dá)率92％(46/50)高于W-HCC的73.9％(17/23)，組間表達(dá)差異

7、具有顯著性（P＜0.05）。GPC3在73例HCC中癌組織和癌旁組織中表達(dá)率分別為86.3％(63/73)和6.8％(5/73)，組間表達(dá)差異具有顯著性（P＜0.05）。
　　 6.β-catenin的陽性表達(dá)率在W-HCC、M-HCC、P-HCC中分別為52.2％(12/23)、60％(15/25)和68％(17/25)。β-catenin在A-HCC中的陽性表達(dá)率64％(32/50)高于W-HCC的52.2％(12/23)，

8、組間表達(dá)差異沒有顯著性(P＞0.05)。β-catenin在73例HCC中癌組織和癌旁組織中表達(dá)率分別為60.3％(44/73)和13.7％(10/73)，組間表達(dá)差異具有顯著性（P＜0.05）。
　　 7.CyclinDl的陽性表達(dá)率在W-HCC、M-HCC、P-HCC中分別為56.5％(13/23)、60％(15/25)和76％(19/25)。CyclinDl在A-HCC中的陽性表達(dá)率68％(34/50)高于W-HCC的56

9、.5％(13/23)，組間表達(dá)差異沒有顯著性(P＞0.05)。CyclinDl在73例HCC中癌組織和癌旁組織中表達(dá)率分別為64.4％(47/73)和11％(8/73)，組間表達(dá)差異具有顯著性（P＜0.05）。
　　 8.GPC3蛋白和β-catenin蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.246，P＜0.05);β-catenin蛋白和CyclinDl蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.507，P＜0.01); GPC3蛋白和CyclinDl蛋

10、白的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.286，P＜0.05)。
　　 9.在HCC中，GPC3表達(dá)與腫瘤直徑以及Edmondson-Steiner病理分級相關(guān)(P＜0.05);β-catenin、CyclinDl表達(dá)與各臨床病理參數(shù)均不相關(guān)(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.GPC3蛋白在早期血清AFP陰性W-HCC中高表達(dá)，H-DN、L-DN、FNH和癌旁肝臟組織中低表達(dá)或不表達(dá)，表現(xiàn)出GPC3良好的敏感性和特異性

11、，特別與H-DN比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，有望成為血清AFP陰性HCC的早期診斷及鑒別診斷的理想標(biāo)志物。
　　 2.GPC3、CD34和網(wǎng)狀纖維染色在血清AFP陰性W-HCC鑒別診斷比較得:GPC3是一個較敏感及特異的標(biāo)記物，其與CD34和網(wǎng)狀纖維染色聯(lián)合使用對鑒別血清AFP陰性W-HCC與H-DN、L-DN、FNH具有較高的應(yīng)用價值。
　　 3.GPC3、β-catenin和CyclinDl蛋白在HCC中高表達(dá)，提示其在

12、HCC的發(fā)生、發(fā)展中可能起到重要作用。
　　 4.GPC3、β-catenin和CyclinDl蛋白在HCC中表達(dá)三者間存在正相關(guān)性，推測GPC3蛋白在HCC中作用機(jī)制可能和經(jīng)典Wnt/β-catenin信號傳導(dǎo)通路有一定的關(guān)系。
　　 5.GPC3蛋白在HCC中表達(dá)和Edmondson-Steiner病理分級相關(guān)，分化越差，其陽性表達(dá)率越高。除此，GPC3與腫瘤直徑相關(guān)，說明GPC3除與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)外，可能還與腫