葉酸靶向復(fù)合聚合物膠束聯(lián)合給藥系統(tǒng)構(gòu)建的研究.pdf

1、目的：化學(xué)合成葉酸-聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺(FA-PEG-PE)；制備FA-PEG-PE與化學(xué)鍵合在聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺（PEG-PE）的5-氟尿嘧啶（5-FU）形成復(fù)合聚合物納米膠束，并與物理包裹于復(fù)合聚合物納米膠束疏水核中的阿霉素（DOX）形成聯(lián)合給藥；并對葉酸靶向復(fù)合聚合物納米膠束聯(lián)合給藥系統(tǒng)進(jìn)行動(dòng)物水平的藥效學(xué)評價(jià)及細(xì)胞毒性。
　　方法：采用室溫?；磻?yīng)分步合成FA-PEG-PE，紅外、差熱分析法鑒定合成產(chǎn)物，用芘熒光探

2、針法考察載體材料的臨界膠束濃度(CMC）。以FA-PEG-PE與5-FU-PEG-PE復(fù)合聚合物膠束為載體,5-氟尿嘧啶（5-FU）與阿霉素（DOX）形成聯(lián)合給藥，制備葉酸靶向復(fù)合聚合物膠束聯(lián)合給藥系統(tǒng)，并測定其載藥量、形態(tài)、粒徑，并考察了體外釋放特性。肝癌(H22)實(shí)體瘤小鼠為腫瘤動(dòng)物模型，通過靜脈注射評價(jià) FA-PEG-PE+5-FU-PEG-PE/DOX、5-FU-PEG-PE/DOX與5-FU-PEG-PE抑制腫瘤生長情況，并計(jì)

3、算抑制腫瘤生長率、脾指數(shù)及胸腺指數(shù)，光學(xué)顯微鏡下觀察病理切片及各臟器毒性。錄入原始數(shù)據(jù)于計(jì)算機(jī)，用SPSS16.0 for Windows統(tǒng)計(jì)軟件中的One-way ANOVA進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。選用葉酸受體陽性細(xì)胞宮頸癌HeLa細(xì)胞為模型細(xì)胞，采用MTT法對葉酸靶向復(fù)合聚合物膠束聯(lián)合給藥系統(tǒng)進(jìn)行體外細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn),同時(shí)以不含葉酸的聚合物膠束聯(lián)合給藥系統(tǒng)（5-FU-PEG-PE/DOX）、不包裹DOX的聚合物膠束（5-FU-PEG-PE）、游離藥

4、物5-FU、 DOX進(jìn)行對照，觀察細(xì)胞的毒性作用。利用游離葉酸能與葉酸靶向復(fù)合聚合物膠束聯(lián)合給藥系統(tǒng)競爭性拮抗葉酸受體，研究葉酸靶向復(fù)合聚合物膠束聯(lián)合給藥系統(tǒng)的主動(dòng)靶向性。
　　結(jié)果：紫外、紅外、差熱分析、結(jié)果顯示已成功合成FA-PEG-PE，載體材料FA-PEG-PE的CMC為1.5×10-5 mol·L-1，F(xiàn)A-PEG-PE:5-FU-PEG-PE（質(zhì)量比1:1）CMC為1.52×10-5 mol·L-1，F(xiàn)A-PEG-PE

5、:5-FU-PEG-PE（質(zhì)量比2:1）CMC為1.61×10-5 mol·L-1，結(jié)果顯示，該載體材料制備的葉酸靶向復(fù)合聚合物，CMC值比較低，具有較好的穩(wěn)定性。阿霉素（DOX）高聚物膠束載藥量為1.12％,平均粒徑控制在162.5nm，所得納米粒粒徑均一，形態(tài)完整；藥物體外釋放較緩慢。動(dòng)物水平的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示靜脈注射FA-PEG-PE+5-FU-PEG-PE/DOX與5-FU-PEG-PE/DOX，其高劑量的抑瘤率均達(dá)到80％左右,

6、顯著高于6倍劑量（以5-FU含量計(jì)算）的5-FU-PEG-PE組，說明葉酸靶向復(fù)合聚合物膠束中5-FU與DOX小劑量聯(lián)合給藥的抑制腫瘤活性比6倍劑量的聚合物膠束5-FU-PEG-PE單一用藥更強(qiáng)。MTT法細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)顯示葉酸靶向復(fù)合聚合物膠束聯(lián)合給藥（FA-PEG-PE+5-FU-PEG-PE/DOX）能被過量的外源性游離葉酸所阻斷，比其他對照制劑具有更強(qiáng)的抑制葉酸受體陽性HeLa細(xì)胞增長的效果，能有效的靶向HeLa細(xì)胞。
　　結(jié)