妊娠晚期子宮前列環(huán)素合成通路及其意義探討.pdf

1、背景和目的：
　　妊娠是胚胎和胎兒在母體內(nèi)發(fā)育成長的過程,從成熟卵子受精開始,至胎兒及其附屬物自母體排出終止,是非常復(fù)雜、變化極為協(xié)調(diào)的生理過程。大量實(shí)驗(yàn)及研究表明,環(huán)氧化酶通路合成的前列腺素在妊娠分娩過程中發(fā)揮著重要的作用,妊娠期間前列腺素生成增加,維持子宮胎盤血管緊張度,以適應(yīng)孕期血供需要增加的變化,尤其在分娩發(fā)動(dòng)時(shí)能促進(jìn)宮頸成熟,誘發(fā)宮縮。
　　前列腺素按其結(jié)構(gòu),分為A、B、C、D、E、F、G、H、I等類型,不同類型的

2、前列腺素具有不同的功能,目前在生殖過程中研究比較多的前列腺素家族成員主要包括PGH,PGE,PGI,TxA等幾種。早期研究發(fā)現(xiàn)前列腺素家族在卵泡破裂排卵的過程中有重要的作用,如PGE1/2有促進(jìn)胚胎著床,延緩細(xì)胞發(fā)育的作用,也是調(diào)節(jié)著床后胚胎和母體相互作用的主要激素之一;PGF2α在終止妊娠溶解黃體過程中有作用,TxA的作用主要是與前列腺素拮抗,并與之相互調(diào)節(jié)活性;PGI2在輸卵管和子宮中的含量比較豐富,對著床前胚胎發(fā)育、子宮內(nèi)環(huán)境和子

3、宮內(nèi)膜對胚胎應(yīng)答等方面存在一定的調(diào)控作用。有研究表明,早期妊娠子宮中最主要的AA產(chǎn)物是PGI2。晚期妊娠子宮中PGE1及PGF2α的產(chǎn)生在分娩發(fā)動(dòng)過程中起到重要的收縮子宮平滑肌的作用,然而在此過程中PGI2及其它前列腺素物質(zhì)的生成及作用尚不明確。目前普遍認(rèn)為,子宮中PGI2主要由COX-2催化的代謝產(chǎn)生。然而,本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),在某些血管如小鼠的腹主動(dòng)脈及豬腎葉間動(dòng)脈,PGI2主要由COX-1催化AA產(chǎn)生。本研究的目的是明確子宮晚期

4、妊娠狀態(tài)下各型前列腺素的生成變化,了解其主要的AA產(chǎn)物,并進(jìn)一步明確COX-1基因敲除對晚期妊娠子宮主要前列腺素類物質(zhì)生成的影響。
　　方法：
　　1)通過C57BL/6小鼠和同基因型背景的COX-1基因敲除(COX-1-/-)小鼠建立懷孕模型。
　　2)采用蛋白免疫印記法檢測COX-1及前列環(huán)素合成酶(PGI2 synthase;PGIS)蛋白表達(dá)在C57BL/6組小鼠子宮中的改變。
　　3)高效液相色譜‐質(zhì)譜

5、聯(lián)用(HPLC-MS)檢測方法快速檢測小鼠子宮在非孕及妊娠狀態(tài)下產(chǎn)生的前列腺素。
　　4)免疫組織化學(xué)方法檢測PGIS在C57BL/6組小鼠子宮中的表達(dá)定位。
　　結(jié)果：
　　1)C57BL/6小鼠妊娠組子宮中COX-1及PGIS的蛋白表達(dá)比較未孕組顯著升高。
　　2)C57BL/6的雌鼠非孕組離體子宮可檢測6-Keto-PGF1α(PGI2的穩(wěn)定產(chǎn)物)、PGE2、PGF2α;C57孕20天組離體子宮有6-Ket

6、o-PGF1α、PGF2α、TxB2、PGE2、PGD2產(chǎn)生,6-Keto-PGF1α(分子量為370,保留時(shí)間為2.1分鐘)為主要產(chǎn)物,妊娠組較非孕組顯著升高,COX-1-/-妊娠組未檢測到前列腺素類產(chǎn)物生成。
　　3)免疫組化結(jié)果顯示,C57BL/6小鼠妊娠組子宮中PGIS的表達(dá)較非孕組豐富,非孕組PGIS的表達(dá)主要在子宮平滑肌層,而妊娠組在內(nèi)膜固有層及平滑肌層均有豐富表達(dá)。
　　結(jié)論：
　　1)在妊娠子宮中,CO