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1、目的:觀察不同濃度人羊膜勻漿上清液對(duì)體外培養(yǎng)的兔角膜上皮細(xì)胞堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)表達(dá)的影響,探討人羊膜勻漿上清液在促進(jìn)角膜上皮損傷修復(fù)中的作用。 方法:將兔角膜上皮細(xì)胞離體培養(yǎng)并傳代,然后分組。實(shí)驗(yàn)組分別在含10﹪胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液中加入終濃度為40μg/ml,80μg/ml,160μg/ml的人羊膜勻漿上清液,對(duì)照組僅用10﹪胎牛血清的DMEM培
2、養(yǎng)液。分別在培養(yǎng)24h,48h,96h后,采用甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法觀察人羊膜勻漿上清液對(duì)兔角膜上皮細(xì)胞增殖的影響。同時(shí),采用RT-PCR技術(shù),檢測(cè)三個(gè)不同等級(jí)濃度對(duì)兔角膜上皮細(xì)胞bFGF-mRNA表達(dá)的影響。 結(jié)論: 1.人羊膜勻漿上清液具有促進(jìn)兔角膜上皮細(xì)胞增殖的作用,并隨著人羊膜勻漿上清液所含蛋白濃度的增加,其促進(jìn)作用增強(qiáng)。 2.體外培養(yǎng)的兔
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