GABAB受體激活對U87-MG細胞生長的影響.pdf

1、GABAB受體，作為GABA受體的三種受體之一，廣泛地分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中。代謝性GABAB受體是G蛋白偶聯(lián)受體C家族的成員，由GABAB1和GABAB2兩個亞基組成，GABAB1亞基的胞外區(qū)包含GABAB受體激動劑結合位點，GABAB2亞基的跨膜區(qū)可以結合別構調節(jié)劑，如CGP7930。GABAB2亞基的胞內(nèi)區(qū)主要負責結合G蛋白。
　　有趣的是，在一些人的癌細胞和組織中檢測到了GABAB受體表達量的增加，另外，據(jù)報道，GABAB受

2、體特異性激動劑baclofen抑制了許多癌細胞的生長，如胃癌、小呼吸道肺癌以及人肝癌，這些都暗示著GABAB受體在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中可能具有潛在的作用。
　　腦膠質瘤是顱內(nèi)瘤中發(fā)病率比較高的一類腫瘤，約占其46％。但是傳統(tǒng)的細胞毒性化療藥物并無特異性。FAK、ERK1/2和 AKT是細胞中非常重要的信號轉導途徑。Failly等發(fā)現(xiàn)ERK和AKT在體外腦膠質瘤的細胞存活，抗凋亡過程中有重要的作用。另外，據(jù)報道，F(xiàn)AK的表達量和腦膠質瘤

3、惡性程度具有正相關性。
　　本文以腦膠質瘤U87-MG細胞為研究對象，初步探討了GABAB受體的激活對該細胞的細胞效應和信號通路的影響，用GABAB受體激動劑baclofen長時間處理腦膠質瘤細胞，發(fā)現(xiàn)baclofen對U87-MG細胞具有抑制作用。為了探討這種抑制作用的機制，用baclofen處理U87-MG細胞，免疫印跡結果顯示AKT的磷酸化程度降低，但是 caspase-3并沒有發(fā)生剪切，說明 GABAB受體的激活對細胞的抑

4、制作用可能依賴于AKT磷酸化水平降低且未引起細胞凋亡。但是，與已報道的肝癌、肺癌的抑制作用相比，該抑制作用并不顯著，為了查明這一現(xiàn)象的原因，用U0126（ERK1/2抑制劑）和baclofen長時間處理細胞，用MTT法檢測細胞的活力。結果卻發(fā)現(xiàn)：當U0126濃度為10μM的時候，GABAB受體的激活對ERK1/2磷酸化水平降低而引起的細胞抑制作用并沒有提高。當U0126濃度為100nM的時候，baclofen的處理組對該腦膠質瘤細胞抑制

5、具有一定的恢復作用。為了解釋這一現(xiàn)象，用激動劑baclofen和U0126（100 nM）對細胞進行了短時間處理時，發(fā)現(xiàn)p-ERK仍有激活。這一結果表明這種保護作用可能由p-ERK的激活所調節(jié)。
　　另據(jù)免疫印跡結果顯示：當用PF573228（10μM）處理細胞時，發(fā)現(xiàn)p-ERK1/2不能被baclofen激活，當PF573228濃度降到100 nM時，發(fā)現(xiàn)p-ERK1/2又可被baclofen激活，說明p-FAK在ERK的磷酸化