高表達mM-CSF的血液腫瘤細胞對巨噬細胞功能性極化的作用.pdf

1、碩士學位論文高表達mMCSF的血液腫瘤細胞對巨噬細胞功能性極化的作用所在院所：血液學研究所研究生姓名：指導教師：導師小組：學科專業(yè)：完成日期：中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩士研究生學位論文高表達mMCSF的血液腫瘤細胞對巨噬細胞功能性極化的作用摘要巨噬細胞是免疫系統(tǒng)中重要的效應細胞，其表型和功能具有極強的可塑性。不同的微環(huán)境下，巨噬細胞可發(fā)生表型及功能極化從而呈現(xiàn)出不同的功能。腫瘤組織中巨噬細胞的功能具有兩面性，是腫瘤發(fā)展過程中的一把“

2、雙刃劍”。巨噬細胞集落刺激因子(MCSF)是一個多功能的細胞因子，其異常表達和功能與多種疾病的發(fā)生和進程密切相關。膜結合MCSF(nl】ⅥCSF)是它的一種選擇性剪接產物，在血液系統(tǒng)惡性腫瘤中可檢出其高表達，具有粘附分子樣作用，可以通過并置性作用機制部分代替MCSF的功能?；诮孝鲆籆SF高表達常發(fā)生于造血系統(tǒng)惡性腫瘤中，提示它在這些惡性疾病中具有重要的生物學意義。本論文是在我室前期研究的基礎上，對高表達InMCSF的血液腫瘤細胞對巨噬

3、細胞功能性極化的影響進行了初步探索。采用裸鼠皮下成瘤實驗，將高表達mMCSF的血液腫瘤細胞接種裸鼠。免疫熒光法觀察瘤組織中巨噬細胞的分布及表型特征。發(fā)現(xiàn)瘤組織中有大量的巨噬細胞浸潤，且巨噬細胞表達選擇性活化巨噬細胞表面標記CD206。采用流式細胞術分選瘤組織中的巨噬細胞，對其表型和功能進行進一步探索。雖然能獲得一定數量的巨噬細胞，但巨噬細胞易貼壁，回收率不高。故選取小鼠單核巨噬細胞系RAW2647與高表達n吐訂CSF的血液腫瘤細胞體外共

4、培養(yǎng)，流式細胞術檢測共培養(yǎng)巨噬細胞表面分子CD206(選擇性活化巨噬細胞表面標記)和細胞因子IL10，IL12，IL6，n師Q的蛋白水平表達情況。實時定量PCR檢測高表達I洲CSF的血液腫瘤細胞對巨噬細胞基因表達的影響。吞噬實驗檢測巨噬細胞功能的變化。結果顯示，高表達mMCSF的血液腫瘤細胞顯著上調巨噬細胞表面選擇性活化巨噬細胞表面標記CD206的表達強度；上調細胞因子IL一10，n師a的表達水平，下調IL—12，IL6的表達水平；基因