盧戈氏液染色法結(jié)合COX-2、VEGF-C、EGFR、ki-67、P63蛋白表達在食管癌早期病變中的意義.pdf

1、背景：我國是食管癌高發(fā)國家，以華北晉、冀、豫太行山地區(qū)死亡率最高，其次以江蘇、福建、四川等省受害也甚大。迄今，其確切病因和機制仍不十分清楚。在食管癌早期病變的發(fā)生、發(fā)展過程中，癌前病變是一個活躍、不穩(wěn)定的發(fā)展階段，具有雙向轉(zhuǎn)歸的特性，已引起廣泛關(guān)注。食管粘膜盧戈氏染色是發(fā)現(xiàn)早期食管癌及癌前病變的有效方法。如何在內(nèi)鏡下檢出早期病變，并經(jīng)病理和現(xiàn)代分子技術(shù)及時確定早期食管癌及癌前狀態(tài)，對食管癌的預(yù)防、早期診治和預(yù)后具有重要意義，也是近年來臨

2、床病理研究的熱點。 目的： 本研究應(yīng)用內(nèi)鏡盧戈液染色法聯(lián)合活檢組織COX-2、VEGF-C、EGFR、ki-67、P63蛋白檢測，旨在分析與食管癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)的多個基因蛋白在癌變不同階段的表達狀況、色素內(nèi)鏡檢查與病理結(jié)果之間的相關(guān)性、以及各基因蛋白之間的相關(guān)性，從食管癌的發(fā)生、血管、淋巴管生成和細胞增殖等多方面探討癌前病變的分子機制和癌變的早期分子事件，為食管癌前病變和早期癌的診斷提供新的科學(xué)依據(jù)。 方法：

3、 1．內(nèi)鏡下縱觀食管粘膜全貌，細致觀察局部微細形態(tài)變化，采用1.25％盧戈氏液染色，記錄食管粘膜著色情況、部位、邊緣、范圍等。染色后顯色模式分為四級(標準參照Masaki法)，按照標準記錄歸類。 2．活檢組織10％福爾馬林固定，石蠟包埋，HE染色，進行組織學(xué)診斷，根據(jù)其異型性程度和(或)累及范圍分為低級別上皮內(nèi)瘤變和高級別上皮內(nèi)瘤變及早期癌。 3．從內(nèi)鏡食管盧戈氏液染色檢查1879例中，隨機選擇病理檢查結(jié)果為早期癌64

4、例、高級別上皮內(nèi)瘤變34例、低級別上皮內(nèi)瘤變35例，并選取正常粘膜13例做對照，通過免疫組織化學(xué)染色法檢測COX-2、VEGF-C、EGFR、ki-67、P63的蛋白表達。 4．將內(nèi)鏡染色分級、組織學(xué)診斷及基因蛋白表達檢測結(jié)果進行對照研究和統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果： (1)內(nèi)鏡染色圖像與組織學(xué)診斷關(guān)系：分析結(jié)果顯示，食管粘膜病灶盧戈氏染色肉眼觀察的圖像級別，與病理診斷結(jié)果之間存在顯著的負相關(guān)關(guān)系，即隨著食管染色級別的降

5、低，組織學(xué)病變程度加重。 (2)免疫組織化學(xué)染色結(jié)果：病理分級各組間COX2、VEGF-C、GEFR、Ki67、P63表達量構(gòu)成比均有統(tǒng)計學(xué)差異。病理分級與上述各蛋白的表達存在正相關(guān)關(guān)系，隨著病理分級的增高，COX2、VEGF-C、GEFR、Ki67、P63蛋白表達量也增高。VEGF與EGFR、Ki67、P63蛋白表達量、EGFR與Ki67蛋白表達量、 Ki67與P63蛋白表達量均存在正相關(guān)關(guān)系。 結(jié)論： (1)

6、內(nèi)鏡輔以染色盧戈氏液技術(shù)及病理檢查已成為當今發(fā)現(xiàn)、診斷食管癌前病變的最佳方法，準確可靠，克服了內(nèi)鏡取檢的隨意性和盲目性，為癌前病變的進一步研究起到最基本保障作用。 (2)在食管癌早期病變中，隨著食管上皮病變的加重，Cox-2陽性表達率和表達強度呈上升趨勢，提示Cox-2是食管癌病變過程的一個早期分子事件，其蛋白的表達在食管上皮癌變過程中可能起著重要作用。 (3)VEGF-c在活檢組織中表達量的增加與病理分級程度呈正相關(guān)關(guān)

7、系，可以提示細胞的惡性分化趨勢或程度，可能作為食管早期癌發(fā)生的預(yù)警指標之一。 (4)EGFR表達增強是食管癌早期病變發(fā)生發(fā)展過程中的分子事件，在活檢組織中EGFR蛋白表達量呈中、強度表達，預(yù)示可能進入癌前病變的發(fā)展階段，成為上皮內(nèi)瘤變的預(yù)測指標。 (5)Ki67在正常食管粘膜中不表達或低度表達，而在低級別瘤變中Ki67表達量與正常粘膜表達已有統(tǒng)計學(xué)差異，提示Ki67可作為食管癌前病變的生物學(xué)指標。 (6)P63表

8、達量在上皮內(nèi)瘤變及早期癌階段呈中等度或強度表達，預(yù)示病變進展至癌前病變的階段，可作為食管癌前病變的生物學(xué)指標。 (7)VEGF表達量與EGFR、Ki67、P63表達量、EGFR與Ki67表達量、 Ki67與P63表達量均存在正相關(guān)關(guān)系，說明食管癌早期病變中存在著多因素、多基因的協(xié)同作用的機制。本研究結(jié)果顯示， EGFR與VEGF-C、Ki-67、P63，尤其是VEGF-C、Ki-67與P63的聯(lián)合檢測對于預(yù)測上皮內(nèi)瘤變的發(fā)展趨勢