免疫球蛋白樣抑制性受體KIR基因與HLA-Cw的匹配對(duì)NK細(xì)胞活性影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探索自然殺傷(natural killer，NK)細(xì)胞免疫球蛋白樣受體(killerimmunoglobulin-like receptor，KIR)基因和HLA-Cw配體匹配數(shù)對(duì)NK細(xì)胞活性的影響；研究NK細(xì)胞KIR2DS1基因表達(dá)對(duì)AML(急性髓系白血病)靶細(xì)胞殺傷活性的影響作用及探討NK細(xì)胞KIR/HLA-Cw(human leucocyte antigen-Cw，人類白細(xì)胞抗原Cw位點(diǎn))錯(cuò)配的殺傷機(jī)制。 方法：采用

2、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和順序特異性引物(PCR-SSP)基因分型技術(shù)分別檢測(cè)27例健康供者及30例患者HLA-Cw、KIR基因；NK細(xì)胞磁珠分選試劑盒負(fù)向分選高純度供者來(lái)源的NK細(xì)胞作為效應(yīng)細(xì)胞；AML患者新鮮骨髓分離的單個(gè)核細(xì)胞作為靶細(xì)胞；抗CD158a，CD158b單克隆抗體封閉NK細(xì)胞KIR2DL1，KIR2DL2/3受體；MTT比色法檢測(cè)KIR受體封閉前后，KIR基因與HLA-Cw不同組合的NK細(xì)胞對(duì)AML細(xì)胞的殺傷率。 結(jié)果：

3、磁珠負(fù)選NK細(xì)胞，經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)，測(cè)的分選后CD3-/CD56+16+細(xì)胞含量為(90.8±6.08)％；NK細(xì)胞KIR基因與靶細(xì)胞HLA-Cw的匹配數(shù)少NK細(xì)胞的殺傷功能強(qiáng)，0個(gè)匹配的殺傷率為(50.66±8.40)％，1個(gè)匹配與2個(gè)匹配的殺傷率分別為(38.28％±6.71)％，(19.84±4.32)％，F(xiàn)=20.226，P<0.001；1個(gè)相合的KIR/HLA-Cw配對(duì)組中>50％表達(dá)抑制性KIRs的NK細(xì)胞殺傷率為10％，2

4、5％-50％的殺傷率20％，<25％殺傷率55％，F(xiàn)=16.276，p<0.001；NK細(xì)胞抑制性KIR受體封閉后，NK細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的殺傷作用增強(qiáng)t=-3.00，P=0.005；C1組KIR2DS1+的NK細(xì)胞對(duì)C2組靶細(xì)胞的殺傷作用高于C1組及C1/C2組的靶細(xì)胞，殺傷率分別為(57.370±1.400)％、(44.190±4，666)％、(36.770±6.56)％，F(xiàn)＝11.87，P＝0.021，KIR受體封閉后差異更為明顯，F(xiàn)=