江蘇地區(qū)漢族人群HLa-Cw基因多態(tài)分析及KIR2D-HLa-C基因組合與SLE相關(guān)性研究.pdf

1、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)是一種典型的累及全身各系統(tǒng)的自身免疫病。臨床表現(xiàn)為多器官、多系統(tǒng)的損害，目前認(rèn)為與遺傳、免疫、病毒及激素等多種因素有關(guān)，其中遺傳因素在SLE的發(fā)病中發(fā)揮重要的作用。
　　目前已經(jīng)證實NK細(xì)胞和部分T功能失調(diào)是SLE發(fā)病的一個重要因素。NK細(xì)胞功能的發(fā)揮依靠其表面的受體及其配體轉(zhuǎn)導(dǎo)的抑制性或者激活性信號來調(diào)節(jié)。這些受體中，殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體(ki

2、ller-cell immunoglobulin-like receptors，KIR)與其配體HLA-I分子結(jié)合，傳導(dǎo)抑制性或活化性信號，兩種信號的平衡決定了NK細(xì)胞與靶細(xì)胞的作用結(jié)果，從而在免疫應(yīng)答過程中發(fā)揮了重要的調(diào)節(jié)作用。KIR和HLA基因均屬于多態(tài)性豐富的遺傳系統(tǒng)。多個研究證實KIR與HLA的多態(tài)性與自身免疫性疾病、病毒感染疾病、自發(fā)性流產(chǎn)等具有一定的相關(guān)性。
　　本研究前期探討了江蘇地區(qū)漢族人群及SLE患者的KIR基因

3、、基因型及單倍型的分布規(guī)律；現(xiàn)以KIR2D的配體HLA-Cw作為研究對象，探討其在健康人群及SLE病人中的分布規(guī)律，并分析KIR-HLA基因組合與SLE發(fā)病的關(guān)系。
　　方法：
　　1、使用PCR-SSP方法檢測183例江蘇地區(qū)漢族人群的HLA-Cw01～08的等位基因分布，運(yùn)用x2檢驗對HLA-Cw01-08基因表現(xiàn)頻率進(jìn)行分析。
　　2、通過PCR-SSP方法對187例SLE患者進(jìn)行HLA-Cw01～08的等位基因

4、分析；根據(jù)不同的診斷結(jié)果、合并體癥、病程長短等差異進(jìn)行分組，以x2檢驗和確切概率法進(jìn)行統(tǒng)計分析，比較不同分組之間HLA-Cw01～08等位基因的分布差異。
　　3、以PCR-SSP方法分析183名健康對照人群及96例SLE患者的KIR2D各等位基因及HLA-C1、C2基因的分布頻率，運(yùn)用x2檢驗及確切概率法統(tǒng)計分析不同的KIR2D/HLA-C基因組合頻率在兩組間的差異。
　　結(jié)果：
　　1、183份江蘇地區(qū)漢族健康人群

5、共檢出8種HLA-Cw等位基因；其中HLA-Cw01、03、06、07型為常見型。有12例樣本未擴(kuò)增出HLA-Cw01～08等位基因，占總?cè)藬?shù)的6.60％。
　　2、經(jīng)吻合度x2檢驗驗證了江蘇地區(qū)漢族人群的取樣樣本符合Hardy-Weinberg平衡(x2=223.5，df=28，P>0.05)。第二組的HLA-Cw02、04、05、06基因頻率之和(GF=0.1869)小于第一組的HLA-Cw01、03、07、08型之和(GF=

6、0.6063)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)。
　　3、SLE組HLA-Cw0303型等位基因表現(xiàn)頻率高于正常對照組(13.90％VS4.68％)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.003)；其余等位基因型的組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　4、合并患有狼瘡腎炎SLE組以及合并患有干燥綜合癥的SLE組的HLA-Cw03基因頻率低于單純SLE組(P<0.05)；病程長短不同的組間HLA-Cw01～08等位基因陽性頻

7、率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　5、SLE組KIR1D基因頻率顯著低于正常對照組，KIR2D各等位基因在兩組間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。A、B型單倍體陽性頻率在兩組間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　6、HLA-C1、C2基因表現(xiàn)頻率及HLA-C1/C1、HLA-C1/C2和HLA-C2/C2單倍型頻率在SLE組與正常對照組間的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　7、SLE組KIR2

8、DS3+/HLA-C1-基因組合的陽性率高于正常對照組(P=0.022)，而KIR2DS2～3+/HLA-C1+基因組合頻率的比較結(jié)果則相反(P=0.005)。其他基因組合的組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、江蘇地區(qū)漢族人群HLA-Cw基因分布具有明顯的不均衡性和獨(dú)特的地理及人種特征。HLA-Cw01～08等位基因的分布以HLA-Cw01、03、06、07為主。
　　2、HLA-Cw0303等