低氧對(duì)人牙髓細(xì)胞增殖與遷移能力的作用研究.pdf

1、一彌Rk璁青￡稱(chēng)申＆g位師業(yè)學(xué)導(dǎo)專(zhuān)中山大學(xué)碩：：學(xué)位論文低氧對(duì)人牙髓細(xì)胞增殖與遷移能力的作用研究組SDF—10【對(duì)低氧HDPCs的體外遷移作用。方法：①采用組織塊酶消化法進(jìn)行HDPCs的原代培養(yǎng)，免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定細(xì)胞來(lái)源。取第3～5代HDPCs，用20％與l％氧氣濃度分別培養(yǎng)6h、12h、18h、24h，MTT法觀察細(xì)胞增殖能力的變化；②熒光定量PCR檢測(cè)低氧處理0h、6h、12h、18h、24h后HDPCs中HIF一10【、CXCR4

2、與SDF1etmRNA表達(dá)量的改變；(鴦Transwell實(shí)驗(yàn)觀察低氧HDPCs的遷移能力，探討100ng／mlrhSDF1a作用10h后對(duì)低氧HDPCs的體外遷移作用。結(jié)果：①組織塊酶消化法可有效進(jìn)行HDPCs的原代培養(yǎng)，免疫細(xì)胞化學(xué)顯示所獲得細(xì)胞抗波形絲蛋白染色陽(yáng)性，抗角蛋白染色陰性。用20％與l％氧氣濃度分別培養(yǎng)HDPCs6h、12h、18h、24h后，MTT結(jié)果顯示各觀察時(shí)間點(diǎn)低氧組OD值均高于常氧組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸n笏

3、)，CXCR4與SDF—lamRNA表達(dá)量的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸D05)。與常氧組相比，低氧18h組CXCR4mRNA表達(dá)量上調(diào)(尸n∞)，低氧6h組、低氧18h組、低氧24h組SDF1amRNA表達(dá)量下調(diào)(PO05)。③Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，1％低氧處理可增強(qiáng)HDPCs的遷移能力，同時(shí)lOOng／mlrhSDF10c作用10h體外趨化低氧HDPCs的細(xì)胞數(shù)多于常氧HDPCs(PD酊)。結(jié)論：低氧培養(yǎng)HDPCs24h內(nèi)有效促