土木香內(nèi)酯在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)研究及生物酶法提取當(dāng)歸活性成分的新工藝研究.pdf_第1頁
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1、土木香和當(dāng)歸均為中醫(yī)常用藥材。土木香中揮發(fā)油的主要成分土木香內(nèi)酯具有較好的驅(qū)蟲、抗炎等藥理活性,但其在動(dòng)物體內(nèi)相關(guān)的藥動(dòng)學(xué)特性尚未見報(bào)道,這在一定程度上限制了土木香內(nèi)酯的臨床研究和制劑開發(fā)。當(dāng)歸作為我國(guó)臨床常用中藥,其藥理活性已然確證,但目前對(duì)當(dāng)歸活性成分的提取工藝都是采用水煮或用大量有機(jī)溶劑針對(duì)某一種(或某一類)組分進(jìn)行提取,致使藥材利用率不高,活性成分損失較大,而且大量有機(jī)溶劑的使用對(duì)環(huán)境造成污染。綜上所述,本課題主要從以下幾個(gè)方面

2、進(jìn)行研究:
   第一、本課題采用反相高效液相色譜法研究土木香內(nèi)酯經(jīng)靜脈注射和口服給藥后在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)特性。以14mg/kg的劑量靜脈注射土木香內(nèi)酯后,其在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)模型符合二室模型,主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)為T1/2β=35.897±6.965min,ClB=0.00223(L/kg)/min,AUC=6.464±0.109g·min·L-1,Ke=0.061±0.009min-1;以30mg/kg的劑量灌胃給藥后,土木香內(nèi)酯

3、在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)模型符合一室模型,主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)為:T1/2=44.999±7.017min,Cmax=268.723±15.261μg/mL,Tmax=31.385±9.643min。本課題通過對(duì)土木香內(nèi)酯在大鼠體內(nèi)經(jīng)靜脈注射和口服兩種途徑給藥后的藥動(dòng)學(xué)特性進(jìn)行研究,為土木香內(nèi)酯的進(jìn)一步研究開發(fā)提供理論依據(jù)。
   第二、本課題通過生物酶法處理當(dāng)歸,以阿魏酸和多糖提取率作為評(píng)價(jià)指標(biāo),研究酶用量、酶解溫度、酶解時(shí)間及pH等單因

4、素對(duì)其提取率的影響,進(jìn)而采用正交實(shí)驗(yàn)和篩選復(fù)合酶對(duì)工藝條件進(jìn)行優(yōu)化。本研究所得新工藝將水提法與酶解法有效結(jié)合起來,使阿魏酸提取率與傳統(tǒng)醇提法相當(dāng)。而且本工藝可實(shí)現(xiàn)當(dāng)歸主要活性成分阿魏酸、藁本內(nèi)酯和多糖的共提取,達(dá)到對(duì)當(dāng)歸的綜合利用的目的。采用生物酶法單獨(dú)提取當(dāng)歸多糖,通過單因素和正交實(shí)驗(yàn),研究所得工藝可使多糖提取率較傳統(tǒng)提取方法提高7.52%。經(jīng)MTT法評(píng)價(jià)生物酶法提取所得當(dāng)歸多糖對(duì)hela細(xì)胞的抑制活性,結(jié)果顯示該多糖具有較好的抗腫瘤

5、活性。
   第三、本課題從當(dāng)歸根、莖、葉及栽培土中篩選內(nèi)生菌,然后就當(dāng)歸內(nèi)生菌與其主要活性成分阿魏酸和藁本內(nèi)酯的相關(guān)性進(jìn)行研究。實(shí)驗(yàn)首先確定無菌當(dāng)歸苗的最適栽培條件,然后利用篩選所得內(nèi)生菌浸染無菌當(dāng)歸苗,培養(yǎng)14天后用高效液相色譜法測(cè)定當(dāng)歸苗中藁本內(nèi)酯和阿魏酸含量的變化,并進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果表明,當(dāng)歸內(nèi)生真菌和混合菌對(duì)活性成分(藁本內(nèi)酯、阿魏酸)的產(chǎn)生有促進(jìn)作用,其中內(nèi)生真菌的促進(jìn)作用更為明顯,藁本內(nèi)酯產(chǎn)量增加6.6倍,阿魏

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