降鈣素基因相關(guān)肽在先天性脛骨假關(guān)節(jié)病變組織中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的: 先天性脛骨假關(guān)節(jié)（CPT）是小兒矯形外科的難題之一，其以脛骨骨不連為主要臨床表現(xiàn)。國(guó)內(nèi)外學(xué)者不斷探索其病因?qū)W、病理學(xué)及有效的臨床治療方法，雖然取得了一定的成果，但至今仍無(wú)法明確其根本病因及發(fā)病機(jī)制。目前已經(jīng)通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，先天性脛骨假關(guān)節(jié)病變部位的骨膜異常增厚，并向骨組織侵襲生長(zhǎng)，阻礙局部骨組織的正常生長(zhǎng)，進(jìn)而影響骨折愈合，形成假關(guān)節(jié)，并且部分學(xué)者認(rèn)為這種骨膜的病理改變是形成先天性脛骨假關(guān)節(jié)的主要病因。而先天性脛骨假關(guān)

2、節(jié)病變部位的骨組織代謝是否正常，尚無(wú)相關(guān)研究報(bào)道。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外大量實(shí)驗(yàn)研究表明神經(jīng)肽物質(zhì)普遍存在于人體代謝活躍的骨組織中，如骨骺、骨髓、骨膜，這些神經(jīng)肽類(lèi)物質(zhì)可直接或間接參與骨代謝的調(diào)節(jié)，尤其是降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）在骨折愈合過(guò)程中發(fā)揮作用。目前尚無(wú)神經(jīng)肽物質(zhì)與先天性脛骨假關(guān)節(jié)的相關(guān)性研究。此研究主要是通過(guò)病理學(xué)和免疫組織化學(xué)方法明確降鈣素基因相關(guān)肽在先天性脛骨假關(guān)節(jié)病變骨膜和骨組織中的表達(dá)情況，以進(jìn)一步探索先天性脛骨假關(guān)節(jié)的病因

3、和發(fā)病機(jī)制。 方法: 1．標(biāo)本收集：標(biāo)本分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組標(biāo)本取材于10例CPT病變骨膜和假關(guān)節(jié)處骨組織的蠟塊，患者年齡8個(gè)月—5歲，平均年齡為3歲，其中男性患兒6例，女性4例，左側(cè)7例，右側(cè)3例，無(wú)雙側(cè)患兒；對(duì)照組為正常骨膜及骨組織，主要取自單側(cè)未累及腓骨的CPT患兒的腓骨骨膜和骨組織，以及膝內(nèi)翻脛骨截骨患兒的骨膜和骨組織，患幾年齡2歲～8歲，平均年齡3歲5個(gè)月。 2．常規(guī)制作石蠟切片。 3．H

4、E染色，觀察病變骨膜及骨組織的病理變化。 4．免疫組化染色：以CGRP的單抗為第一抗體，采用SABC法行免疫組化染色。 5．?dāng)?shù)據(jù)處理：應(yīng)用真彩色醫(yī)學(xué)圖像分析軟件對(duì)免疫組化染色中CGRP表達(dá)結(jié)果進(jìn)行半定量分析，檢測(cè)CGRP在各組中陽(yáng)性表達(dá)的平均光密度（MOD）。應(yīng)用SPSS13．0統(tǒng)計(jì)軟件，進(jìn)行t檢驗(yàn)分析。 結(jié)果: 1．HE染色結(jié)果 正常骨膜組織中外層纖維層較厚，排列整齊，細(xì)胞成分較少，主要為粗大的

5、膠原纖維束，彼此交織成網(wǎng)：生發(fā)層纖維成分少，排列疏松，血管豐富；正常骨組織中骨小梁排列有序，以編織骨為主。在CPT骨膜組織中，骨膜已失去正常結(jié)構(gòu)，內(nèi)含大量纖維母細(xì)胞和增生的膠原纖維，排列紊亂，血管較少，且管壁增厚，管腔狹窄。CPT的骨組織結(jié)構(gòu)紊亂，可見(jiàn)骨小梁，其周?chē)谐晒羌?xì)胞和破骨細(xì)胞分布，并可見(jiàn)纖維結(jié)締組織嵌插于骨組織中，亦可見(jiàn)部分軟骨和骨壞死成分。 2．免疫組化染色結(jié)果 在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的骨膜中，CGRP陽(yáng)性表達(dá)部位

6、均主要在血管壁內(nèi)及其周?chē)?，且CGRP在CPT病變骨膜中的陽(yáng)性強(qiáng)度較正常骨膜中的表達(dá)減弱。 在兩組標(biāo)本骨組織的成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞中CGRP也均呈陽(yáng)性表達(dá)，在CPT病變骨組織中的表達(dá)較正常骨組織中減弱。 結(jié)論: CPT伴隨著CGRP的異常表達(dá)，這種異常表達(dá)降低了局部骨血流量，并且通過(guò)其對(duì)成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的作用使局部骨吸收作用增強(qiáng)，破壞了正常的骨代謝平衡，影響骨折愈合，促進(jìn)了假關(guān)節(jié)的形成。CPT不僅僅是骨膜的病理改變