雙氫青蒿素哌喹片含量測(cè)定研究與傷濕祛痛膏中烏頭堿的檢查研究.pdf

1、雙氫青蒿素哌喹片為青蒿素第二代抗瘧疾藥，是治療瘧疾，尤其是多重抗藥性惡性瘧疾的首選藥物。其兩個(gè)有效成分分別為：雙氫青蒿素(Dihydroartemisinin，DHA)和磷酸哌喹(Piperaquine phosphate，POP)。我國(guó)現(xiàn)行國(guó)家藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，DHA的含量測(cè)定方法為：用硅膠柱分離洗脫后，揮干溶劑，收集殘?jiān)?，?jīng)堿水解產(chǎn)生有紫外吸收的物質(zhì)，紫外分光光度法測(cè)定。該操作步驟多，引入誤差的機(jī)會(huì)多。本課題旨在建立專屬性強(qiáng)、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)

2、便的定量分析方法，采用HPLC-UV法直接測(cè)定雙氫青蒿素哌喹片中的DHA。我國(guó)現(xiàn)行國(guó)家藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，采用紫外分光光度法(Ultraviolet Specterphotometry，UV)測(cè)定雙氫青蒿素哌喹片中磷酸哌喹的含量。由于復(fù)方制劑中干擾因素多，不經(jīng)分離直接采用紫外分光光度法測(cè)定磷酸哌喹的含量誤差較大。 本課題旨在建立專屬性強(qiáng)、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便的定量分析方法，采用HPLC-UV法測(cè)定雙氫青蒿素哌喹片中的PQP。 傷濕祛痛

3、膏是由川烏、草烏等藥材制成的復(fù)方橡皮膏劑，主要用于頭痛、風(fēng)濕痛、神經(jīng)痛等。因?yàn)榇?、草烏中均含有劇毒的烏頭堿類酯型生物堿，而傷濕祛痛膏的我國(guó)現(xiàn)行國(guó)家藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，并未對(duì)烏頭堿進(jìn)行限量控制。所以，為完善傷濕祛痛膏的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，更好地控制產(chǎn)品質(zhì)量，本課題采用薄層色譜法(Thin Layer Chromatography，TLC)對(duì)傷濕祛痛膏中烏頭堿的限量檢查進(jìn)行研究，該檢查方法簡(jiǎn)便、結(jié)果準(zhǔn)確。 方法： 雙氫青蒿素的含量測(cè)定采

4、用HPLC法，用外標(biāo)法以α和β體峰面積之和對(duì)DHA進(jìn)行定量分析。理論板數(shù)按α異構(gòu)體峰或β異構(gòu)體峰計(jì)算均不低于10000。 液相色譜條件(DHA)色譜柱：Phenomenex C18柱(250 mm×4.6mm，5μm)；乙腈-甲醇-0.02 mol·L<'-1>硫酸銨(50:10:40，稀硫酸調(diào)節(jié)至pH 4.8)；流速：1.0 mL·min<'-1>；檢測(cè)波長(zhǎng)：210nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μL。 磷酸哌喹的含量

5、測(cè)定采用HPLC法，用外標(biāo)法以峰面積對(duì)PQP進(jìn)行定量計(jì)算。理論板數(shù)以磷酸哌喹峰計(jì)不低于2000。 液相色譜條件(PQP)色譜柱：Phenomenex C18(250 mm×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相：乙腈-0.022 mol·L<'-1>鹽酸(30:70，三乙胺調(diào)節(jié)至pH 2.3)；流速：1.0 mL.min<'-1>；檢測(cè)波長(zhǎng)：225 nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μL。 烏頭堿的限量檢查采用TLC對(duì)照品比較法，實(shí)

6、現(xiàn)良好分離，重現(xiàn)性好。 薄層色譜條件展開劑：正己烷-乙酸乙酯-無(wú)水乙醇(6.4:3.6:1)；顯色劑：稀碘化鉍鉀試液。 結(jié)果： 雙氫青蒿素的含量測(cè)定方法精密度好，DHA的RSD為0.49％(n=5)；準(zhǔn)確度高，回收率為98.6％；雙氫青蒿素在0.84～25.12μg的范圍內(nèi)，峰面積與濃度間呈現(xiàn)良好的線性，線性方程為A=29987C+1006.6，γ=0.9999(n=7)；信噪比S/N=10時(shí)，雙氫青蒿素的最低定

7、量限為80 ng；供試品溶液在分析濃度下，8小時(shí)內(nèi)基本穩(wěn)定。 磷酸哌喹的含量測(cè)定方法精密度好，PQP的RSD為0.57％(n=6)；準(zhǔn)確度高，回收率為101.3％；磷酸哌喹在0.20～1.21μg的范圍內(nèi)，峰面積與濃度間呈現(xiàn)良好的線性，線性方程為A=525092C+36071，γ=0.9998(n=5)；信噪比S/N=10時(shí)，磷酸哌喹的最低定量限為90 ng，供試品溶液在分析濃度下，8小時(shí)內(nèi)基本穩(wěn)定。 烏頭堿的限量檢查烏