細(xì)胞外尼克酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶通過非酶途徑加重大鼠腦缺血損傷.pdf

1、目的:
　　研究細(xì)胞外尼克酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(eNAMPT)對(duì)腦缺血損傷的影響，并探尋其作用機(jī)制。
　　方法:
　　大鼠側(cè)腦室注射野生型NAMPT蛋白和喪失酶活性的突變NAMPT蛋白H247A，通過大腦中動(dòng)脈栓塞(MCAO)復(fù)灌誘導(dǎo)大鼠局灶性腦缺血，以缺糖缺氧(OGD)誘導(dǎo)原代混合神經(jīng)細(xì)胞和原代神經(jīng)元損傷，Western檢測NAMPT表達(dá)，免疫組化觀擦NAMPT分布變化，TTC染色計(jì)算梗死損傷體積，MTT與LDH釋放檢

2、測細(xì)胞活性，PI、DAPI染色檢測細(xì)胞壞死，ELISA檢測TNF-α釋放。
　　結(jié)果:
　　MCAO再灌注后24小時(shí)，缺血中心區(qū)eNAMPT水平上升，mRNA水平下降，缺血中心區(qū)、周邊區(qū)和假手術(shù)組腦內(nèi)，NAMPT均主要分布在神經(jīng)元。重組NAMPT蛋白腦室內(nèi)注射能夠加重MCAO引起的腦缺血性損傷。在原代培養(yǎng)神經(jīng)元，重組NAMPT蛋白對(duì)正常和OGD誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷均無明顯影響。但在原代培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞，重組NAMPT蛋白能濃度依賴的