抵抗素對人臍靜脈內(nèi)皮細胞vWF和P-selectin的調(diào)節(jié).pdf

1、背景
　　近年來以中心性肥胖、胰島素抵抗為主要特征的代謝綜合征(metabolicsyndrome,MetS)發(fā)病率逐年升高。代謝綜合征患者處于血栓前狀態(tài),易增加動靜脈血栓性疾病的發(fā)病風(fēng)險,但發(fā)病機制尚未完全闡明。抵抗素(resistin)是肥胖與胰島素抵抗的重要中間環(huán)節(jié),具有促炎癥作用。P-選擇素(P-selectin)是一類重要的細胞黏附分子,屬選擇素家族成員,主要表達在活化的血小板和內(nèi)皮細胞表面,介導(dǎo)這些細胞間以及與白細胞的

2、黏附,而有利于炎癥部位白細胞招募到血栓部位,進而促進血栓的形成。假性血友病因子(vonWillebrandFactor,vWF)是鑒定小體內(nèi)皮細胞受損或刺激的特異性標(biāo)志物,通過與血小板結(jié)合而刺激血小板粘附到內(nèi)皮,其升高幅度可反應(yīng)內(nèi)皮細胞損傷的程度。內(nèi)皮細胞P-選擇素和vWF均存在內(nèi)皮細胞的棒狀小體(WP小體)。我們課題組前期臨床研究發(fā)現(xiàn)抵抗素可促進人和鼠血小板P-選擇素的表達,提示抵抗素可能參與血栓形成。在此基礎(chǔ)上,本研究從內(nèi)皮細胞水平

3、研究抵抗素對內(nèi)皮細胞P-選擇素和vWF的調(diào)節(jié)作用探討代謝綜合征患者易患血栓性疾病的機制。
　　目的：
　　體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),觀察不同濃度不同時間抵抗素處理后vWF蛋白和P-選擇素蛋白表達的變化。
　　方法：
　　將體外培養(yǎng)的4-5代人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)分為單純培養(yǎng)基對照組、不同濃度抵抗素(25ng/m

4、L、50ng/mL、100ng/mL)組,培養(yǎng)不同時間(6h、24h、48h)后,(1)ELISA法檢測各組細胞上清液中vWF蛋白含量;(2)FACs法檢測各組P-選擇素表達含量。
　　結(jié)果：
　　(1)25ng/mL、50ng/mL、100ng/mL抵抗素在6h、24h可顯著增加HUVECsvWF表達水平。100ng/mL抵抗素作用6h可顯著增加vWF表達(8.78±0.41％vs6.18±0.11%,p<0.05),50