抗癲癇藥致周圍神經損傷及其防治的實驗性研究.pdf

1、第一部分常用抗癲癇藥對周圍神經損傷的實驗研究 目的：探討常用抗癲癇藥對周圍神經的損傷作用。 方法：成年(2月齡)和嬰幼(7 日齡)大鼠各 8 組(n=16)，分別灌喂PHT(62.5mg/kg.d)、PB (30.0 mg/kg.d)、VPA (3 12.5 mg/kg.d)、CZP (1.25mg/kg.d)、CBZ (187.5 mg/kg.d)、TPM (40 mg/kg.d)、OXC (312.5mg/kg.d)

2、和等體積0.5％CMC用作對照，用藥 4 周后成年鼠行坐骨神經傳導速度檢查，然后每組隨機取8只采集坐骨神經和脊髓標本用于本部分和第二部分實驗，余下一半停藥4周后再處死取標本。成年和嬰幼鼠坐骨神經標本分別作原纖維分離、半薄切片和電鏡觀察。計數原纖維病變發(fā)生率，以及病變性質。 結果：①除TMP和VPA組外，各用藥組中至少有1只大鼠存在坐骨神經傳導功能異常。②除TMP外，其余 6 種 AEDs 均同時引起成年和嬰幼大鼠顯著但程度不同的

3、神經原纖維病變(7.2％～20.2％)。尤以 PHT 最明顯，兩年齡組病變纖維發(fā)生率均高達20％左右。其后依次是PB(成年鼠)或VPA(嬰幼鼠)、CBZ、CZP和OXC等。病變性質以髓鞘脫失為主。③兩年齡組之間原纖維病變率沒有明顯差異。停藥后的嬰幼鼠自我修復能力遠較成年鼠強。 結論：PHT、PB、CBZ、VPA、CZP、OXC 都存在誘發(fā)周圍神經損傷的不同程度可能性，主要表現為髓鞘脫失。嬰幼鼠具有與成年鼠相同發(fā)生率和幾乎一致的敏

4、感性，停藥后恢復均較緩慢，但嬰幼鼠較成年鼠顯著。 第二部分抗癲癇藥物誘發(fā)周圍神經損傷機制的探討 目的：探討抗癲癇藥物誘發(fā)周圍神經損傷的可能機理。 方法：以第一部分實驗中 AEDs 用藥 4 周組動物取坐骨神經和脊髓標本作如下檢查：①脊髓前角運動神經元凋亡檢測：脊髓腰膨大切片免疫組化檢測Bcl-2和Bax蛋白表達以及凋亡神經元TUNEL檢測；②血清和坐骨神經組織的抗氧化能力檢測：以相應的試劑盒分別檢測T-AOC、S

5、OD和GSH-PX活性；③用試劑盒檢測血清和坐骨神經NO含量以及NOS活性。 結果：①嬰幼鼠PB、CZP和VPA給藥組脊髓前角Bax蛋白表達分別是正常對照的2.15、1.82和2.41倍，Bax/Bcl-2比值也分別是同齡對照組1.94、1.66及2.21倍。7種 AEDs 對成年鼠和PHT、CBZ、OXC和TPM對嬰幼鼠脊髓Bax蛋白表達無明顯影響。與Bax檢測結果一致，僅在PB、CZP和VPA嬰幼鼠脊髓前角見TUNEL陽性細

6、胞顯著增多；②PHT、CZP、CBZ和OXC均可導致成年和嬰幼大鼠血清與坐骨神經T-AOC不同程度降低。PHT、PB、CZP、CBZ和 OXC 等5 種 AEDs同時引起成年與嬰幼大鼠血清和坐骨神經SOD活力一致性下降。PHT、PB、VPA、CZP、CBZ和OXC同時導致成年和嬰幼鼠血清GSH-PX活性顯著下降。PHT、PB、CBZ和OXC同時引起兩個年齡組坐骨神經GSH-PX活性降低。CZP尚對嬰幼鼠坐骨神經GSH-PX活性有明顯影響

7、；③兩年齡PB組血清和坐骨神經NOS活性較對照組顯著性升高；PB可引起成年鼠血清以及嬰幼鼠血清與坐骨神經。NO含量顯著升高。其余各AEDs成年和嬰幼組NOS/NO沒有顯著變化。 結論：①盡管PB、CZP和VPA確實引發(fā)了脊髓前角神經元的過度凋亡，但大鼠所發(fā)生的 AEDs 周圍神經損傷與其脊髓神經元受損并不存在因果關系；②PHT、PB、VPA、CZP、CBZ和OXC所致周圍神經損傷與這些藥物破壞體內、尤其神經組織內超氧化—抗氧化平

8、衡，導致周圍神經組織氧化應激狀態(tài)有密切關系；③除PB外，NO不是多數AEDs致周圍神經損傷的主要因素。 第三部分抗氧化劑對AEDs周圍神經損傷的防治作用 目的：探討抗氧化劑VitE和GBE對AEDs周圍神經損傷的防治作用。 方法：成年(2月齡)和嬰幼(7日齡)SD大鼠各56只，各自隨機分為7個組：PHT+VitE、PB+VitE、CZP+VitE和pHT+GBE、PB+GBE、CZP+GBE，和空白對照(CG)組

9、。3種AEDs劑量同前，VitE和GBE各按100mg/kg.d計量。CG為等體積0.5％CMC另以第二部分單用AEDs組為陽性對照。根據體重增長隨時調整 AEDs 劑量。用藥4周后處死動物，采集血清、坐骨神經和脊髓標本。分別用作：①坐骨神經組織病理學檢測：包括原纖維分離、半薄切片和電鏡觀察；②脊髓前角運動神經元的凋亡檢測：免疫組化檢測Bcl-2和Bax蛋白表達以及 TUNEL 凋亡細胞；③血清和坐骨神經組織的抗氧化能力：包括T-AOC

10、、SOD和GSH-PX活性檢測；④血清和坐骨神經NO含量以及NOS活性檢測。 結果：①在所有成年或嬰幼大鼠并用VitE或GBE的AEDs用藥組中，坐骨神經原纖維病變率均顯著地低于未加抗氧化劑組(p<0.01)。無論成年或嬰幼組，GBE的防治效果均明顯優(yōu)于 VitE，存在非常顯著性差異(P<0.01)；② PB+GBE 和 CZP+GBE 嬰幼組脊髓神經元Bax蛋白表達較單用PB或CZP顯著下降(P<0.01)，補充VitE卻不能

11、顯著減少這兩組嬰幼鼠Bax蛋白表達。其余各組與CG組比較未見顯著性差異；③合并使用抗氧化劑VitE或 GBE 均可顯著或非常顯著地糾正AEDs 對體內(血清和周圍神經)T-AOC、SOD和GSH-PX活性的抑制(P<0.05或P<0.01)。VitE的各組對SOD和GSH-PX活性增加均稍優(yōu)于GBE，部分差異達顯著性；④補充GBE可顯著降低PB誘導的血清或坐骨神經NOS/NO增高，VitE亦有改善NOS/NO的趨勢，但未達顯著差異水平。