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文檔簡介
1、目的:了解維吾爾醫(yī)學(xué)四種正常體液質(zhì)人群腸道菌群結(jié)構(gòu)的多樣性以及四種體液質(zhì)之間菌群分布的差異性,比較體液分型之間和菌群的分布可能存在的差異,本研究通過維吾爾醫(yī)學(xué)體液和氣質(zhì)學(xué)說將以健康人為研究對象分為四種體液質(zhì),從現(xiàn)代分子生物學(xué)的角度,應(yīng)用ERIC-PCR指紋圖譜技術(shù)及變性梯度凝膠電泳(DGGE)指紋圖譜技術(shù)對維吾爾醫(yī)學(xué)正常四種體液質(zhì)人群腸道菌群分布狀況進行分析比較。
方法:①對206例健康人進行維吾爾醫(yī)學(xué)體液分型,其中血液質(zhì)
2、(53人),粘液質(zhì)(51人),膽液質(zhì)(50人)和黑膽質(zhì)(52人)采集受檢者糞便樣品,提取總DNA,以此作為模板獲得反映腸道菌群組成的ERIC-PCR指紋圖譜;計算各樣本多樣性指數(shù)和群落相似性系數(shù),得到四種正常體液質(zhì)人腸道菌群分布的相似性與多樣性。②對四種體液質(zhì)受檢者糞便樣品提取細(xì)菌總DNA,針對16S rDNA的V6~V8可變區(qū)設(shè)計一對通用引物并擴增該區(qū),用PCR產(chǎn)物進行DGGE,得到反映腸道菌群結(jié)構(gòu)特征的DNA指紋圖譜進行比較分析,條
3、帶回收、克隆、序列測定。
結(jié)果:①ERIC-PCE指紋圖譜血液質(zhì)組樣品條帶數(shù)顯著多于其他三組(P<0.05),粘液質(zhì)組樣品條帶數(shù)少于其他3組(P<0.05)血液質(zhì)組腸道菌群結(jié)構(gòu)較其他各組具有更豐富的多樣性(P<0.05),粘液質(zhì)組菌群結(jié)構(gòu)多樣性相對較低(P<0.05)②PCR-DGGE指紋圖譜血液質(zhì)組樣品條帶數(shù)顯著多于其他三組(P<0.05),粘液質(zhì)組樣品條帶數(shù)少于其他3組(P<0.05)③各組內(nèi)出現(xiàn)頻率多的能代表各組樣品
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