遺傳性卵巢癌家族BRCA1-2和MSH2基因突變的分析研究.pdf

1、目的：
　　探討1例遺傳性卵巢癌的致癌機(jī)制，并對家系中所有女性進(jìn)行了國際公認(rèn)與家族遺傳性卵巢癌有一定關(guān)聯(lián)的BRCA1/2基因及MSH2基因外顯子的測序分析，以探索這個(gè)家系中是否存在有意義的錯(cuò)義突變，分析其可能的致病機(jī)制，并對其家系中的高危人群制定個(gè)性化的隨訪和診治方案。
　　方法：
　　詳細(xì)詢問先證者的病史、輔助檢查結(jié)果及家族信息，繪制家系圖譜，了解其發(fā)病特點(diǎn)；對該家系所有健在的女性成員均抽血取樣，對已逝患者提取病理組

2、織樣本，同時(shí)抽取患同樣病理類型的散發(fā)性卵巢患者2名的血樣，作為對照組。提取RNA后應(yīng)用PCR擴(kuò)增，將PCR產(chǎn)物行直接測序比對，以探索這個(gè)家系中是否存在有意義的錯(cuò)義突變，對突變可能導(dǎo)致的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)及分子構(gòu)象進(jìn)行預(yù)測和相關(guān)研究。
　　結(jié)果：
　　1.在此家系中，明確診斷為卵巢癌者3人，病理均為卵巢漿液性囊腺癌，與相關(guān)文獻(xiàn)中所報(bào)道的遺傳性卵巢癌病理類型相符，且與散發(fā)性卵巢癌相比，發(fā)病年齡早、容易出現(xiàn)轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)；
　　2. B

3、RCA1全基因測序共發(fā)現(xiàn)突變8處，其中無意義突變3處（2314C>T，2543T>C，4540T>C）；已有記錄突變2處，分別與宮頸癌（2844C>T）及子宮內(nèi)膜異位癥（3345A>G）相關(guān)；新發(fā)現(xiàn)突變3處（3780A>G，5069 A>G，3326A>T），尚無文獻(xiàn)報(bào)道。在3處新發(fā)現(xiàn)的突變中，3780A>G、5069A>G造成氨基酸變化，而3326A>T突變則造成Arg突變成終止密碼子。3名確診為卵巢癌的患者共同存在3326A>T突變

4、；
　　3. BRCA2全基因測序共檢測出突變7處，其中無意義突變5處（3623A>G，4034T>C，4790A>G，6740G>C，7469A>G）；無記錄突變1處（1716T>A）；有記錄突變1處（1342A>C），與乳腺癌相關(guān)。3名確認(rèn)為卵巢癌的患者共同存在1342A>C突變；
　　4. MSH2全基因測序共發(fā)現(xiàn)突變2處（1380C>A、2011A>G），僅存在于1名卵巢癌患者中，其余女性檢測均為陰性；
　　5

5、.無家族腫瘤病史的卵巢漿液性囊腺癌患者BRCA1/2、MSH2基因測序均正常。
　　6.在III代女性基因檢測中發(fā)現(xiàn)BRCA2基因1342A>C突變攜帶者4人，其中1人同時(shí)攜帶BRCA1基因3326A>T突變，目前4人隨訪檢查均未發(fā)現(xiàn)明顯異常。
　　結(jié)論：
　　根據(jù)基因檢測分析，此家系為典型的遺傳性卵巢癌家族，所檢出的BRCA1基因雜合突變3326A>T和BRCA2基因雜合突變1342A>C極可能是該家族遺傳性卵巢癌的

6、致病基因?，F(xiàn)有的研究及調(diào)查提示BRCA2基因雜合突變1342A>C與乳腺癌的發(fā)生高度相關(guān)，而BRCA1基因3326A>T使該位點(diǎn)上精氨酸突變?yōu)榻K止密碼子，導(dǎo)致翻譯終止、蛋白縮短、分子模型構(gòu)象發(fā)生巨大變化。由此推測，該家系BRCA1基因3326A>T與BRCA2基因1342A>C兩者突變相互協(xié)同作用共同導(dǎo)致了該家族卵巢癌的發(fā)生。針對可疑致癌基因的突變位點(diǎn)在全家系女性中行基因篩查，獲得家族中患癌的高危人群，并對其進(jìn)行隨訪，做到早發(fā)現(xiàn)、早診斷

7、、早治療，必要時(shí)可行預(yù)防性治療。
　　在歐美國家，BRCA1/2基因突變的檢測已成為卵巢癌高危人群重要的篩查手段，但在中國，有關(guān)高危家族卵巢癌患者和散發(fā)性卵巢癌患者的外周血BRCA1/2基因突變的研究并不深入。目前尚未有中國人遺傳性卵巢癌BRCA1/2基因常見突變位點(diǎn)的詳細(xì)報(bào)道。本研究著手于臨床一典型的遺傳性卵巢癌家系，并通過基因測序發(fā)現(xiàn)了BRCA1/2的兩個(gè)相對固定突變位點(diǎn)，對中國人群遺傳性卵巢癌的致癌基因檢測進(jìn)行了一次有益的探