已閱讀1頁，還剩41頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀
版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權，請進行舉報或認領
文檔簡介
1、目的：
構建針對人LKB1(liver kinase B1，或STK11 serine/threonine protein kinase11)基因的特異性短發(fā)卡RNA（short hairpin RNA，shRNA）表達的慢病毒載體，并觀察轉染人肝癌細胞Huh7后對LKB1 mRNA和蛋白的表達。
方法：
根據(jù)人LKB1的基因信息，設計3條針對LKB1基因cds區(qū)的siRNA序列，同時設計1條negativ
2、e序列用于RNAi陰性對照（Negative Control,NC），組建與shRNA相對應的4對互補的單鏈DNA。將合成的序列插入空載體GV115（元件順序為：hU6-MCS-CMV-EGFP）中，重組獲得慢病毒載體。進行測序鑒定后，再轉染293T細胞產(chǎn)生病毒液，得到的病毒液再轉染肝癌細胞株Huh7。熒光顯微鏡觀察轉染后細胞的情況，實時熒光定量PCR檢測轉染后細胞LKB1 mRNA的表達情況，Western印跡法檢測轉染后細胞LKB1
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 綿羊Myostatin基因shRNA慢病毒載體的構建與鑒定.pdf
- 人Bmi-1基因shRNA慢病毒表達載體的構建、病毒的濃縮及其病毒滴度的測定.pdf
- 重組Mash1慢病毒表達載體的構建及表達.pdf
- STAT1和H2AX基因shRNA慢病毒載體構建及食管癌細胞體外轉染.pdf
- mTOR shRNA慢病毒的構建包裝及對T淋巴細胞的轉染.pdf
- Si-RNA和過表達慢病毒載體轉染大鼠肝星狀細胞SUMo-1表達的影響.pdf
- SFRP5在胰腺癌中的表達意義及其shRNA慢病毒載體的構建.pdf
- 陽離子脂質體和慢病毒載體轉染MSCs的比較研究.pdf
- IK6基因特異性ShRNA慢病毒載體的構建與鑒定.pdf
- 表達Cdc42-shRNA重組慢病毒載體的構建及其對膀胱癌細胞影響的實驗研究.pdf
- LKB1抑制脂肪生成和分化的機制研究.pdf
- 可誘導表達hBMP-2基因的慢病毒載體的構建及其慢病毒的產(chǎn)生和鑒定.pdf
- HLA-G和FasL慢病毒載體的構建及其轉染人胚胎干細胞的研究.pdf
- 小鼠血管生成素-1慢病毒表達載體的構建及鑒定.pdf
- pXZ208-EGFP-HO-1慢病毒表達載體的構建與鑒定.pdf
- 人bFGF重組慢病毒載體轉染BMSCs的實驗研究.pdf
- 人ATP2A3基因慢病毒shRNA載體質粒的構建及鑒定.pdf
- 慢病毒ShRNA干擾PGC-1α表達在DR中的作用.pdf
- 慢病毒載體穩(wěn)定轉染人角質形成細胞克隆的基因表達譜和蛋白譜分析.pdf
- 大鼠CKIα的原核表達、純化和攜帶大鼠CKIα基因慢病毒載體的構建及轉染鼠BMSCs的實驗研究.pdf
評論
0/150
提交評論