金黃色葡萄球菌α-溶血素可下調(diào)大鼠肺水通道蛋白-1的表達(dá).pdf

1、目的： 水通道蛋白(Aquaporins，AQPs)是一類可調(diào)節(jié)水進(jìn)出細(xì)胞膜的水通道同源大家族的總稱。目前，在人類及哺乳動(dòng)物體內(nèi)共發(fā)現(xiàn)13個(gè)亞型。隨著對(duì)AQPs研究的不斷深入，在分子水平上解釋了水轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制。1992年，AQP1首先被鑒定，它在體內(nèi)扮演著重要角色，參與滲透壓驅(qū)動(dòng)下的水的轉(zhuǎn)運(yùn)，介導(dǎo)藥理作用及水腫形成。金黃色葡萄球菌是院內(nèi)獲得性肺炎的常見致病菌，α-Toxin是其主要毒素，可結(jié)合在宿主細(xì)胞膜上，插入細(xì)胞膜疏水區(qū)，形成七

2、聚體孔型通道，造成水或離子通過導(dǎo)致細(xì)胞凋亡或破裂死亡。細(xì)菌的感染最明確的后果是組織內(nèi)水穩(wěn)態(tài)的失衡，一般表現(xiàn)為局部或全身的水腫。水穩(wěn)態(tài)的機(jī)制尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫組化方法明確AQP1在大鼠肺組織的表達(dá)及分布，并探討金黃色葡萄球菌α-溶血素(α-Toxin)對(duì)大鼠肺水通道蛋白-1(AQP1)表達(dá)的影響。 方法： Wistar健康雄性大鼠24只，隨機(jī)分為鹽水對(duì)照組，α-Toxin 6小時(shí)組，α-Toxin10小時(shí)組，α-To

3、xin24小時(shí)組，每組各6只。HE染色觀察各組大鼠肺組織病理改變，測定肺濕干比重(W/D)、動(dòng)脈血氧分壓(PaO2)及免疫組化SABC法檢測AQP1表達(dá)變化。 結(jié)果： 1、金黃色葡萄球菌a-Toxin引起大鼠肺水腫及肺出血，且損傷程度與毒素作用時(shí)間相關(guān)，HE染色，W/D及PaO2可標(biāo)志肺損傷程度。與對(duì)照組比較，模型組均出現(xiàn)肺損傷表現(xiàn)，6-24小時(shí)存在明顯的液體代謝異常。 2、AQP1主要表達(dá)在肺微血管內(nèi)皮，且不同

4、部位肺微血管內(nèi)皮AQP1表達(dá)密度有所不同。 3、在α-Toxin作用6-24小時(shí)，不同部位肺微血管內(nèi)皮AQP1表達(dá)明顯下調(diào)以10小時(shí)為高峰，24小時(shí)AQP1表達(dá)有所恢復(fù)(P<0.05)。 討論： 1、AQP1是最早被鑒定出的水通道蛋白，主要存在于肺微血管內(nèi)皮。在正常肺組織中細(xì)支氣管旁毛細(xì)血管內(nèi)皮、小血管內(nèi)皮及肺泡周圍毛細(xì)血管內(nèi)皮均有AQP1表達(dá)，且前兩者較后者AQP1表達(dá)明顯增強(qiáng)(P<0.05)，提示AQP1在肺

5、組織不同部位分布密度不同。 2、金黃色葡萄球菌α-Toxin在細(xì)胞膜上能夠形成孔道，故又稱為孔道形成毒素。低劑量α-Toxin可導(dǎo)致肺水腫。 3、從病理角度觀察，α-Toxin引起肺泡結(jié)構(gòu)的破壞包括肺泡腔的擴(kuò)大和血管內(nèi)皮的損傷，提示肺微血管內(nèi)皮可能存在α-Toxin的敏感靶位。 4、應(yīng)用α-Toxin腹腔注射大鼠，成功制造肺損傷模型，我們推測α-Toxin影響了肺部AQP1表達(dá)。 5、在α-Toxin作用