原花青素對小鼠視網(wǎng)膜光化學(xué)損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的:觀察小鼠視網(wǎng)膜光化學(xué)損傷后病理形態(tài)及凋亡相關(guān)指標(biāo)的改變，探討原花青素(proanthocyanidins，PC)對小鼠視網(wǎng)膜光化學(xué)損傷(retinal photochemicai injury)的保護(hù)和拯救作用。
　　 方法:
　　 1.昆明小鼠50只，隨機(jī)分為A組(正常對照組)、B組(光化學(xué)損傷模型組)和C組給藥組[分為C1組(僅造模前給藥組)，C2組(造模前后給藥組)和C3組(僅造模后給藥組)]，每組均有10只

2、小鼠。
　　 2.造模方法：自制光損傷箱，箱內(nèi)6個(gè)面均裝有36 W的冷光源熒光燈共20個(gè)，光照度為(16473.5±402.8)1x。動(dòng)物分光照前先暗適應(yīng)12 h，之后光照12 h，連續(xù)3個(gè)循環(huán)，總光照時(shí)間為36 h。在光照全過程中，箱內(nèi)溫度保持在28～32℃。C組小鼠按400mg/kg灌胃給原花青素混懸液；所有動(dòng)物于造模后第7天處死并取出眼球行石蠟包埋切片。
　　 3.部分石蠟切片進(jìn)行HE染色，光鏡下觀察視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)改

3、變，并對視網(wǎng)膜外核層厚度進(jìn)行測量。
　　 4.部分石蠟切片進(jìn)行凋亡原位檢測(TUNEL法)標(biāo)記凋亡細(xì)胞，并計(jì)算凋亡指數(shù)(AI)。
　　 5.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行，計(jì)算各組平均值(x)和標(biāo)準(zhǔn)差S，兩組間比較用方差分析。
　　 結(jié)果:
　　 1.正常小鼠視網(wǎng)膜內(nèi)外節(jié)排列整齊，分界清晰，外核層排列緊密，染色均勻，細(xì)胞形態(tài)規(guī)整。
　　 2.視網(wǎng)膜光化學(xué)損傷模型成功建立，HE染色形態(tài)學(xué)觀

4、察發(fā)現(xiàn)：視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)疏松，內(nèi)外節(jié)破壞嚴(yán)重，外核層明顯變薄，僅留1～2層。
　　 3.給藥組中，C2組視網(wǎng)膜十層結(jié)構(gòu)較完整，分界較清晰，外核層細(xì)胞排列基本整齊，內(nèi)外節(jié)輕度腫脹。C1組視網(wǎng)膜內(nèi)外節(jié)輕度腫脹，間隙增寬，外核層間隙稍增寬。C3組視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)較C1組內(nèi)外節(jié)腫脹明顯，間隙增寬，外核層細(xì)胞部分受到損害，排列紊亂。
　　 4.TUNEL染色正常小鼠視網(wǎng)膜呈陰性；光化學(xué)損傷組在外核層有大量陽性著染細(xì)胞核，原花青素給藥組僅見