基于組學研究對致病性鉤體毒力因子及免疫靶標的分析.pdf

1、鉤端螺旋體病是由致病性鉤端螺旋體引起的一種全球范圍內(nèi)的人獸共患病，感染鉤端螺旋體可引起黃疸、發(fā)熱、出血以及急性的多器官衰竭等危害，其嚴重威脅著人類的健康，與此同時也對畜牧業(yè)造成了極大的損失。
　　由于鉤體特殊的進化地位以及有效遺傳操作系統(tǒng)的缺乏，人們對于鉤體及鉤體病的研究進展一直十分緩慢，鉤體的主要致病因子及致病機制仍不明確，亦缺乏相應的診斷及疫苗靶標。直到2003年第一株鉤體全基因組測序數(shù)據(jù)的報道，基于全基因組測序技術的相應研究

2、不斷為人們對于鉤體生理、代謝以及致病機制的研究和認識提供新的方法和視野。
　　本論文基于對我國致病性鉤體主要血清群代表株的基因組測序研究，初步探討了鉤體不同血清群泛基因組的組成，并以核心基因組為基礎進一步分析了這些血清群間的進化關系。另外，通過454焦磷酸測序并結合Sanger測序技術，完成了我國鉤體疫苗株56610(401)株的全基因組測序研究，鑒定出了其染色體外環(huán)狀質(zhì)粒的存在以及特異的O抗原編碼區(qū)域。結合課題組已經(jīng)完成全基因組

3、測序的另一株鉤體疫苗菌株56603(Gui44)株以及國際上已公布的6株鉤體（4株強毒及2株腐生型鉤體）全基因組測序數(shù)據(jù)，我們也對8株不同毒力的鉤體全基因組進行了比較分析。通過對致病性菌株特有基因的篩選，預測到20個潛在的核心毒力編碼基因。
　　在全基因組測序的基礎上，我們完成了問號鉤體56601株、56603(Gui44)株及56610(401)株的表面暴露蛋白質(zhì)組質(zhì)譜鑒定，結合優(yōu)化的表面暴露蛋白預測策略共篩選的81個核心表面暴

4、露蛋白、61個非必需表面暴露蛋白以及122個特異表面暴露蛋白。另外，我們在分泌蛋白質(zhì)組內(nèi)篩選到一個保守存在的蛋白-硫醇過氧化物酶。通過實驗證實，由基因LA0862編碼的鉤體硫醇過氧化物酶可以通過非典型的分泌途徑分泌到胞外，在鉤體與宿主相互作用的過程中，保護鉤體免受外源過氧化物壓力的威脅。重組表達的鉤體硫醇過氧化物酶刺激產(chǎn)生的抗體與致病性鉤體具有較好的交叉免疫反應，鉤體硫醇過氧化物酶和鉤體免疫的動物血清也可以發(fā)生反應，這說明LA0862可