糖尿病腎病患者腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤及腎小管NF-κB、MCP-1和OPN表達(dá)的研究.pdf

1、目的：糖尿病腎病(DN)是糖尿病(DM)重要的慢性并發(fā)癥，是終末腎衰竭的主要原因之一。實(shí)驗(yàn)研究提示，腎小管-間質(zhì)損傷被認(rèn)為是DN病程進(jìn)展的媒介，其中炎癥細(xì)胞和炎癥介質(zhì)在小管.間質(zhì)損傷中發(fā)揮了重要作用。核因子κB(NF-κB)是重要的炎癥因子，可控制多種重要的炎癥因子如單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)、骨橋蛋白(OPN)等因子的基因表達(dá)。本研究通過檢測DN患者腎小管-間質(zhì)中NF-κB、MCP-1、OPN的表達(dá)改變，分析其與DN臨床表現(xiàn)及

2、小管間質(zhì)病理損害的相關(guān)關(guān)系，以探討炎癥因子在DN小管-間質(zhì)損傷中的作用。 方法：研究對象分為DN組和對照組。DN組共23例，為2006年～2007年在天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院腎內(nèi)科住院并經(jīng)腎活檢病理檢查確診的DN患者；對照組共10例，為同期在該院泌尿外科行腎癌根治手術(shù)的患者，取其切除的腎臟中遠(yuǎn)離腫瘤組織且病理檢查未被浸潤的腎皮質(zhì)。用HE、PASM、Masson組織化學(xué)染色技術(shù)觀察小管-間質(zhì)病理形態(tài)；用免疫組化法觀察小管.間質(zhì)中NF-κ

3、B、MCP-1、OPN及FN表達(dá)改變；用原位雜交法檢測小管-間質(zhì)NF-κBp65mRNA表達(dá)改變；檢測DN組尿液N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平、24小時(shí)尿蛋白定量、血清肌酐(Scr)、空腹血糖(FBG)、血壓(BP)及病程等臨床資料，并分析它們與小管-間質(zhì)炎癥分子表達(dá)的相關(guān)關(guān)系。 結(jié)果：1.腎組織光鏡病理形態(tài)學(xué)檢查，對照組小管-間質(zhì)未見明顯病變；DN組存在明顯的小管上皮細(xì)胞空泡顆粒變性、灶狀萎縮、間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤及纖維

4、化、小動(dòng)脈管壁增厚、管腔狹窄等病理表現(xiàn)，且病理征與其尿蛋白密切相關(guān)(r=0.875，P<0.01)。 2.免疫組化及原位雜交檢測發(fā)現(xiàn)，對照組腎小管、間質(zhì)無NF-κB表達(dá)；DN腎小管上皮細(xì)胞NF-κBp50和p65及p65mRNA表達(dá)明顯上調(diào)，其表達(dá)水平與患者蛋白尿水平顯著相關(guān)(r分別為0.920、0.930和0.885，P<0.001)。 3.免疫組化檢測顯示，對照組腎小管、間質(zhì)無MCP-1、OPN、FN表達(dá)；DN組可見

5、MCP-1、OPN表達(dá)于小管上皮細(xì)胞、FN表達(dá)于間質(zhì)，且MCO-1、OPN表達(dá)水平與FN表達(dá)顯著相關(guān)(r分別為0.792和0.763，P<0.001)，與NF-κBp65的表達(dá)呈顯著相關(guān)(r分別為0.802和0.815，P<0.001)。 4.腎小管間質(zhì)炎癥因子表達(dá)與臨床資料的相關(guān)分析顯示，NF-κBp65、MCP-1、OPN在小管間質(zhì)中的表達(dá)水平與血清肌酐水平顯著相關(guān)(r分別為0.745、0.675和0.583，P<0.01)

6、；與蛋白尿水平呈顯著相關(guān)(r分別為0.930、0.825和0.869，P<0.001)；與FBG顯著相關(guān)(r分別為0.829、0.712和0.771，P<0.001)；與尿液NAG水平顯著相關(guān)(r分別為0.826、0.734.和0.870，P<0.001)。 結(jié)論：1.DN患者腎小管間質(zhì)存在變性萎縮、炎細(xì)胞浸潤及纖維化等明顯炎性病理改變，且病變程度隨著DN進(jìn)展而加重。 2.DN患者腎小管上皮細(xì)胞NF-κB、MCP-1、O