結(jié)核患者外周血B細(xì)胞數(shù)量和組成的變化規(guī)律.pdf

1、目的:
　　1.分析健康對(duì)照、結(jié)核菌潛伏感染者、結(jié)核患者外周血B細(xì)胞及其亞群和亞型、T細(xì)胞亞群、Th17、Treg細(xì)胞的變化。
　　2.分析結(jié)核患者治療過(guò)程中外周血B細(xì)胞及其亞群和亞型、T細(xì)胞亞群、Th17、Treg細(xì)胞的變化。
　　3.探討結(jié)核患者外周血B細(xì)胞數(shù)量和組成變化的規(guī)律及其臨床意義，為B細(xì)胞計(jì)數(shù)在結(jié)核患者診斷、預(yù)后和療效評(píng)估中的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)、檢測(cè)技術(shù)和標(biāo)準(zhǔn)。
　　方法:
　　1.采用EL

2、ISPOT技術(shù)測(cè)定受試者外周血細(xì)胞中結(jié)核菌抗原特異性（ESAT-6蛋白抗原及ESAT-6/CFP-10多肽抗原)IFN-γ的產(chǎn)生情況，根據(jù)結(jié)果確定入組健康對(duì)照和潛伏感染人群。2.應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)分析32例潛伏感染者（LTBI）、45例健康對(duì)照（HD）、40例涂陽(yáng)、培陽(yáng)結(jié)核患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)中B細(xì)胞(CD3-CD19+細(xì)胞)及B細(xì)胞亞群(CD3-CD19+CD5-CD1d+、CD3-CD19+CD5+CD1d+、CD3-CD

3、19+CD5-CD1d-、CD3-CD19+CD5+CD1d-四群細(xì)胞)、B細(xì)胞亞型（未成熟B細(xì)胞表型為sIgM++CD10+CD19+CD20+CD27-CD38++，初始B細(xì)胞表型為sIgM+CD10-CD19+CD20+CD27-CD38-/+，記憶性 B細(xì)胞表型為sIgM+CD10-CD19+CD20+CD27+CD38-/+，漿細(xì)胞表型為sIgM+CD10-CD19+CD20-/+CD27++CD38+++)、T細(xì)胞亞群（CD

4、3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+T細(xì)胞）、Th17、Treg（CD4+CD25+CD127low調(diào)節(jié)性T細(xì)胞）細(xì)胞應(yīng)答水平。
　　結(jié)果:
　　1.結(jié)核患者外周血B細(xì)胞的變化:結(jié)核患者外周血CD19+B細(xì)胞百分比與健康者、潛伏感染者比較無(wú)明顯差異。結(jié)核患者外周血CD19+B細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)與健康者及潛伏感染者比較明顯減低(P＜0.01)。
　　2.結(jié)核患者治療過(guò)程中外周血B細(xì)胞的變化:動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)結(jié)核患者抗癆治療前、治療

5、3月、治療6月B細(xì)胞變化發(fā)現(xiàn)，結(jié)核患者治療6月時(shí)CD19+B細(xì)胞百分比較治療3月時(shí)明顯增加(P＜0.01)。結(jié)核患者隨著治療時(shí)間延長(zhǎng)，外周血CD19+B細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)明顯增加(P＜0.05)。
　　3.結(jié)核患者外周血B細(xì)胞亞群的變化:結(jié)核患者外周血B細(xì)胞低于健康對(duì)照及潛伏感染者，結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;結(jié)核患者外周血CD19+CD5-CD1d+B細(xì)胞顯著高于潛伏感染者（P＜0.05），與健康對(duì)照無(wú)差異;結(jié)核患者外周血CD19+CD5+CD

6、1d+B細(xì)胞顯著高于健康對(duì)照(P＜0.05)及潛伏感染者(P＜0.05)，結(jié)核潛伏感染者與健康對(duì)照比較無(wú)差異;結(jié)核患者外周血CD19+CD5-CD1d-細(xì)胞顯著低于潛伏感染者(P＜0.05)，與健康對(duì)照比較無(wú)差異;CD19+CD5-CD1d-細(xì)胞三組間無(wú)明顯差異。
　　4.結(jié)核患者治療過(guò)過(guò)程中B細(xì)胞亞群的變化:動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)結(jié)核患者抗癆治療前、治療3月、治療6月B細(xì)胞變化發(fā)現(xiàn)，具有調(diào)節(jié)功能的CD1d+CD5+細(xì)胞雖然在抗結(jié)核治療3月時(shí)仍

7、有升高，但是在治療6月時(shí)已逐漸下降，其他細(xì)胞群也是隨著治療時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸趨于正常。
　　5.結(jié)核患者外周血B細(xì)胞各亞型的變化:比較健康者、潛伏感染者、結(jié)核患者外周血未成熟B細(xì)胞、初始B細(xì)胞、記憶性B細(xì)胞、漿細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，結(jié)核患者外周血未成熟B細(xì)胞明顯低于健康者(P＜0.01)和潛伏感染者（P＜0.05）。結(jié)核患者外周血初始B細(xì)胞較潛伏感染者明顯增加（P＜0.01）。結(jié)核患者外周血記憶性B細(xì)胞均明顯低于健康者(P＜0.01)和潛伏感染

8、者(P＜0.001)。結(jié)核患者外周血漿細(xì)胞高于健康者(P＜0.05)。
　　6.結(jié)核患者治療過(guò)程中外周血B細(xì)胞各亞型的變化:動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)結(jié)核患者抗癆治療前、治療3月、治療6月B細(xì)胞亞型變化發(fā)現(xiàn)，治療過(guò)程中，未成熟B細(xì)胞、記憶性B細(xì)胞均有所增加，僅治療3月未成熟B細(xì)胞與治療前比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。而漿細(xì)胞則隨著治療時(shí)間的延長(zhǎng)而減少(P＜0.01)。
　　7.T細(xì)胞亞群、非特異性Th17、Treg細(xì)胞應(yīng)答水平在三組人群

9、中差別:結(jié)核患者外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)均明顯低于健康者及潛伏感染者(P＜0.001);結(jié)核患者Th17細(xì)胞應(yīng)答水平顯著低于健康者(P＜0.01)，也低于結(jié)核潛伏感染者，但結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;Treg細(xì)胞應(yīng)答水平顯著高于健康者和結(jié)核潛伏感染者(P＜0.001,P＜0.01)。
　　8.結(jié)核患者治療過(guò)程中T細(xì)胞亞群、非特異性Th17、Treg細(xì)胞應(yīng)答水平:動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)結(jié)核患者治療過(guò)程中T細(xì)胞變化發(fā)現(xiàn)