曲安奈德膽管洗脫支架的制作及其在膽管良性狹窄中的應用.pdf

1、目的
　　制作一種新型可以緩釋曲安奈德的膽道支架，觀察帶藥支架藥物釋放的規(guī)律,并評價其在兔膽管良性狹窄模型中應用的有效性及安全性。
　　方法
　　第一部分將曲安奈德和聚乳酸-羥基乙酸（PLGA）粉末以20%的帶藥濃度溶于兩者的共同溶劑四氫呋喃（THF）中。并將6Fr膽道引流管浸剪成數(shù)個50mm段泡于上述溶劑中，10分鐘后取出真空烘干，常溫避光保存。通過測重計算支架所載曲安奈德的質(zhì)量；采用磷酸鹽緩沖液（PBS，PH7.4

2、）將曲安奈德稀釋為系列標準液，在240nm紫外分光峰面積進行相關分析。將曲安奈德支架放入8mlPBS中，置于37℃的恒溫搖床中持續(xù)浸泡48h，然后換新鮮的PBS重復浸泡，直至第40天。以標準 PBS液為對照組，對第1-40天留取的浸出液進行色譜分析，計算曲安奈德在浸出液中的濃度。
　　第二部分選用健康新西蘭白兔36只，隨機分3組，藥物支架組（12只），普通支架組（12只）及對照組（12只）。電灼損傷膽總管隨后經(jīng)十二指腸乳頭逆向插入

3、支架至膽總管中,對照組僅電灼膽總管，無特殊處理，術后觀察動物的一般狀況、生存率，肝功能變化。30 d后取狹窄處標本，HE染色光鏡下觀察膽管組織，免疫組織化學SP法測量TGF-β1及α-SMA的表達。
　　結果
　　第一部分稱量測得平均每根支架上曲安奈德的負載量為510μg,單位面積的載藥量為1.63μg/mm2。曲安奈德均能從支架表面持續(xù)釋放，前5天濃度波動在6.32μg/ml到8.78μg/ml之間，前5天共釋放曲安奈德1

4、80.61μg，占總釋放量的47.23％，之后濃度平穩(wěn)波動在1.85到3.51μg/ml之間，第23天后開始降低，第33天的洗脫濃度為0.53μg/ml，隨后即不可測得。
　　第二部分植入藥物及普通支架均可有效預防膽總管損傷后狹窄的形成，肝功能檢測兩支架組血清總膽紅素無明顯升高，藥物支架組血清總膽紅素波動在0.61μmol/l將至0.73μmol/l之間，普通支架組血清總膽紅素波動在0.54μmol/l將至0.75μmol/l之間

5、，對照組肝功能持續(xù)升高。病理學觀察藥物支架組膽管無纖維化增生，電灼處膽管直徑較普通支架組略大。對照組電灼處管腔狹窄，炎性細胞浸潤，黏膜下膠原纖維增生明顯。免疫組化可見α-SMA、TGF-β1強表達于對照組狹窄膽管，在普通支架組電灼處膽管表達也較強，弱表達于藥物支架組電灼處膽管，兩支架組之間具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　結論
　　第一部分用PLGA作為藥物載體能成功制備曲安奈德藥物膽道洗脫支架；體外研究表明該藥物洗脫支