雷帕霉素和雷洛昔芬對(duì)蛋白尿慢性腎纖維化大鼠腎臟保護(hù)作用.pdf

1、背景與目的:腎纖維化是各種原因所致慢性腎臟疾病(Chronic kidney disease，CKD)走向終末期腎臟病(End stage renal diseases，ESDR)的共同途徑，其以Ⅰ、Ⅳ型膠原以及纖維連接蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成份的集聚為特點(diǎn)。近年研究表明肌成纖維細(xì)胞在腎纖維化中發(fā)揮重要作用，抑制肌成纖維細(xì)胞活化、增殖、轉(zhuǎn)分化可有延緩腎纖維化進(jìn)展。雷帕霉素(Rapamycin，RPM)是一種新型、強(qiáng)效免疫抑制劑，具有很強(qiáng)的抗炎

2、、抗病毒、抗細(xì)胞增殖以及血管保護(hù)作用，已有研究表明RPM對(duì)局灶節(jié)段性腎小球硬化癥有明顯的保護(hù)作用。雷洛昔芬(Raloxifene，RLX)為選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑，有研究證實(shí)RLX可以減少糖尿病腎病尿蛋白排出量、抑制系膜細(xì)胞增殖和減少ECM的沉積。本研究通過檢測(cè)多柔比星蛋白尿慢性腎纖維化大鼠腎組織中α-SMA表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化來探索腎纖維化過程中腎臟內(nèi)肌成纖維細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化及其在蛋白尿和腎纖維化發(fā)展過程中的作用。同時(shí)觀察前述兩種藥物對(duì)蛋白尿

3、慢性腎纖維化大鼠動(dòng)物模型的腎臟保護(hù)作用及其對(duì)肌成纖維細(xì)胞的影響，進(jìn)一步探討其可能機(jī)制。
　　 方法:通過重復(fù)給予大鼠尾靜脈注射多柔比星制備蛋白尿慢性腎纖維化大鼠模型。雄性SD大鼠96只隨機(jī)分為：正常組(A組，n=24)，模型組(B組，n=24)，RPM給藥組(C組，n=16)，RLX給藥組(D組，n=32)。首次注射多柔比星后第2周末起分別給予C組、D組大鼠RPM 1.5㎎·㎏﹣1、RLX 3.0㎎·㎏﹣1，每日灌胃給藥。于4、

4、7、10、13 wk末收集A、B、D組標(biāo)本，7wk末收集C組標(biāo)本。檢測(cè)24 h 尿蛋白排泄率、應(yīng)用HE、PAS、Masson染色觀察腎臟病理改變，免疫組化檢測(cè)α-SMA、FN蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果:①各組大鼠24 h尿蛋白排泄率變化4、7、10、13 wk末B、D組及7 wk末C組大鼠24 h 尿蛋白明顯高于同時(shí)間點(diǎn)A組(P＜0.01)，且隨病程逐漸升高，C，D組低于同時(shí)間點(diǎn)B組(P＜0.01)。②各組大鼠腎臟病理形態(tài)學(xué)變化光

5、鏡示B組大鼠于7 wk末開始腎小球硬化呈局灶節(jié)段性分布，腎小球肥大、間質(zhì)可見局灶性炎細(xì)胞。隨著病程進(jìn)展，纖維化程度和面積加重。13 wk末出現(xiàn)廣泛的腎小球硬化和小管間質(zhì)纖維化。與同時(shí)間點(diǎn)B組相比較，10 wk末時(shí)D組小管間質(zhì)炎癥、腎小球的硬化和小管間質(zhì)纖維化均有明顯減輕,TII評(píng)分差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。③各組大鼠腎組織α-SMA、FN蛋白表達(dá)變化免疫組化半定量結(jié)果顯示，4 wk末B組α-SMA蛋白表達(dá)較A組增多，后隨病程延長(zhǎng)