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1、第一部分金屬巰蛋白在不同時(shí)期的大鼠肝臟中表達(dá)
目的:金屬巰蛋白即metallothionein(MT)是富含半胱氨酸的短肽的蛋白,對(duì)多種重金屬有高度親和性。它對(duì)維持機(jī)體銅和鋅的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,防止重金屬毒性和氧化應(yīng)激起著重要的作用。本研究旨在探討不同年齡對(duì)肝臟MT-1和MT-2 mRNA水平的影響。
方法:從發(fā)育(-2,1,7,14,21,28,35和60天),老齡化(28,60,180,540和800天),妊娠和哺乳期
2、大鼠肝臟中分離總RNA,并用實(shí)時(shí)定量RT-PCR法分析MT的mRNA表達(dá)。
結(jié)果:胎鼠(-2天)和新生鼠(1天)的MT mRNA水平高,出生7天達(dá)到高峰,隨后隨著年齡的增長(zhǎng)而下降。以雄性MT-1為例,在21天斷奶時(shí)其mRNA水平降低了10倍,800天時(shí)降低220倍;雄性比雌性的表達(dá)水平高;妊娠晚期MT表達(dá)減少;分娩時(shí)MT的表達(dá)水平反彈,但哺乳期間再次下降。
結(jié)論:MT mRNA水平受一系列生理因素所影響,即發(fā)育,老齡
3、化,性別,妊娠,哺乳和時(shí)辰。這些變化會(huì)影響不同年齡段機(jī)體抗衰老及對(duì)有毒物質(zhì)的防御功能。
第二部分有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體(Oatp)在不同年齡、性別大鼠肝臟中的表達(dá)
目的:本研究旨在探討發(fā)育、年齡和性別對(duì)肝臟Oatps表達(dá)的影響。
方法:從發(fā)育(-2,1,7,14,21,28,35和60天),老齡化(28,60,180,540和或800天)大鼠肝臟分離總RNA,并用實(shí)時(shí)定量RT-PCR法分析基因的表達(dá),Wester
4、n blot蛋白定性研究。
結(jié)果:肝臟轉(zhuǎn)運(yùn)體Oatp1a1,Oatp1a4,Oatp1a5和Oatp1b2在胎鼠(-2天)、出生時(shí)表達(dá)很低,斷奶(21天)后迅速增加,并在60天達(dá)到峰值;Oatps在60-180天保持穩(wěn)定,并在老年期(540和/或800天)降低; Oatp1a1,Oatp1a4和Oatp1b2均在肝臟中表達(dá)水平較高,而Oatp1a5表達(dá)相對(duì)較低,且雄性高于雌性;在老年大鼠肝臟中,Oatps表達(dá)隨著年齡的增長(zhǎng)而降
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