阿侖磷酸鈉對共育體系中成骨-破骨細(xì)胞生物特性的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:①觀察阿侖磷酸鈉對人成骨細(xì)胞增殖和核因子κβ受體活化因子配體(RANKL)及護(hù)骨素(OPG)mRNA表達(dá)的影響。②觀察阿侖磷酸鈉對共育體系中成骨-破骨細(xì)胞生物學(xué)特性的影響。 材料:手術(shù)中取得的松質(zhì)骨骨塊,阿侖磷酸鈉(杭州默沙東制藥有限公司,批號06130),Ⅱ型膠原酶、胰蛋白酶(Invitrog),胎牛血清(cell science) 方法:①在含不同濃度的阿侖磷酸鈉(10-9~10-4mol/L)培養(yǎng)液中培養(yǎng)成骨

2、細(xì)胞。②阿侖磷酸鈉(10-8mol/L)加入共育體系中,檢測對成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的影響。③成骨細(xì)胞觀察。④以MTT檢測阿侖磷酸鈉對成骨細(xì)胞的增殖的影響。⑤以半定量RT-PCR方法觀察不同濃度阿侖磷酸鈉(10-9~10-5 mol/L)對成骨細(xì)胞表達(dá)OPG/RANKL mRNA的影響。⑥觀察阿侖磷酸鈉對破骨細(xì)胞的影響。 結(jié)果:①10-5、10-4mol/L的阿侖磷酸鈉抑制成骨細(xì)胞增殖,10-9~10-6mol/L的阿侖磷酸鈉促進(jìn)成

3、骨細(xì)胞增殖,其中10-8mol/L的阿侖磷酸鈉對成骨細(xì)胞的增殖作用最強(qiáng)。阿侖磷酸鈉呈濃度依賴性降低RANKL mRNA表達(dá),干預(yù)72h,10-5mol/L抑制作用最大(P<0.01)。阿侖磷酸鈉呈濃度依賴性增加OPG mRNA表達(dá),干預(yù)72h,10-6mol/L增加作用最明顯(P<0.01),而10-5mol/L時(shí)又減低。②阿侖磷酸鈉促進(jìn)共育體系中成骨細(xì)胞的增殖,增強(qiáng)其ALP活性,減弱破骨細(xì)胞TRAP活性,減少破骨細(xì)胞骨吸收陷窩數(shù)。

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