模擬高原低氧條件下大鼠牙周炎動(dòng)物模型中TNF-α、PGE-,2-和IL-8在牙周組織中的表達(dá).pdf

1、牙周炎(periodontal)是口腔兩大類主要疾病之一?，F(xiàn)已證實(shí)牙菌斑中細(xì)菌及其產(chǎn)物是引發(fā)牙周病必須的始動(dòng)因子,細(xì)菌及其毒性產(chǎn)物如細(xì)菌內(nèi)毒素和細(xì)菌酶可直接損傷牙周上皮及結(jié)締組織,同時(shí)又可激活宿主的防御細(xì)胞,釋放多種炎癥介質(zhì)細(xì)胞因子如腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白細(xì)胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、前列腺素E2(Prostaglandin E2,PGE2)等,產(chǎn)生牙周

2、局部炎癥反應(yīng),導(dǎo)致牙周組織和牙槽骨的吸收破壞。在高原環(huán)境下,牙周病的患病率顯著高于其他地區(qū),牙周病檢出率高達(dá)80.8％[1]。鑒于以上高發(fā)病率,對于高原牙周病的病理生理機(jī)制的研究顯得尤為迫切。但目前對于在高原地區(qū)牙周炎的發(fā)生發(fā)展機(jī)制的研究還屬于初步階段,在高原環(huán)境下,低壓低氧的環(huán)境因素如何影響牙周組織的改變,如何改變細(xì)胞因子的分泌及活性作用,以上的細(xì)胞因子改變與牙周病的疾病過程有何相關(guān)等等問題尚未有研究報(bào)道,因此,探討及解決以上問題,可

3、以為預(yù)防及降低高原牙周病的發(fā)病率提出理論依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)?zāi)M高原環(huán)境,建立低氧條件下大鼠牙周炎動(dòng)物模型,觀察大鼠牙周組織病理變化,檢測各組大鼠牙周臨床指標(biāo),用免疫組化法檢測牙周組織中TNF-α、PGE2和IL-8的表達(dá)情況,用ELISA法檢測各組大鼠齦溝液中TNF-α、PGE2、IL-8的含量,初步研討低氧環(huán)境對牙周炎齦溝液中TNF-α、PGE2、IL-8水平變化的影響,以及低氧條件下三種炎癥因子與牙周指數(shù)的相關(guān)性。為探索高原牙周炎發(fā)病、發(fā)

4、展及轉(zhuǎn)歸的規(guī)律,為高原、高寒環(huán)境下牙周炎進(jìn)一步的防治提供參考依據(jù)。
　　 研究方法:
　　 1.建立低氧條件下大鼠牙周炎動(dòng)物模型:將80只SD大鼠,隨機(jī)分為缺氧對照組、缺氧實(shí)驗(yàn)組、常氧對照組及常氧實(shí)驗(yàn)組,每組雌雄大鼠各20只,參照Fischer等[2]方法,分別在常氧與低氧環(huán)境(模擬海拔5000 m高原、23 h/d)下建立大鼠牙周炎模型(缺氧實(shí)驗(yàn)組、常氧實(shí)驗(yàn)組),
　　 2.建模后8周記錄各組大鼠體重等生理指標(biāo)

5、及牙周臨床指標(biāo):牙齦附著喪失程度(attachment lost,AL)、菌斑指數(shù)(plaque index,PLI)、出血指數(shù)(bleeding index,BI),提取齦溝液并切取牙周組織標(biāo)本。
　　 3.采用HE染色檢測牙周組織病理改變;采用免疫組化法檢測牙周組織中TNF-α、PGE2、IL-8的表達(dá)。
　　 4.用ELISA法分別檢測每組大鼠齦溝液中TNF-α、PGE2、IL-8的含量,并分析其與牙周臨床指數(shù)的相

6、關(guān)性。
　　 研究結(jié)果:
　　 1.缺氧實(shí)驗(yàn)組體重一直呈下降趨勢,8周時(shí)牙周袋形成,牙周膜炎癥明顯。牙槽嵴吸收明顯呈蠶食狀,可見明顯的破骨細(xì)胞位于骨吸收陷窩,牙槽骨呈骨質(zhì)疏松狀態(tài)。牙周臨床指標(biāo)與其他各組比較差別非常顯著(P＜0.01)。
　　 2.大鼠牙周組織中TNF-α、PGE2主要于破骨細(xì)胞、牙周膜成纖維細(xì)胞的胞漿中表達(dá)陽性,IL-8陽性著色部位主要于中性粒細(xì)胞的胞漿中表達(dá)陽性,呈棕黃色。TNF-α、PGE2

7、、IL-8在缺氧實(shí)驗(yàn)組的表達(dá)明顯高于常氧實(shí)驗(yàn)組(P＜0.05)及缺氧對照組(P＜0.05)。
　　 3.缺氧實(shí)驗(yàn)組大鼠齦溝液量、TNF-α、PGE2水平均高于其余各組,且與常氧實(shí)驗(yàn)組比較有顯著差異(P＜0.01),而IL-8均低于其余各組,且與常氧實(shí)驗(yàn)組比較有顯著差異(P＜0.01)。
　　 4.缺氧實(shí)驗(yàn)組中。TNF-α、PGE2與AL、PLI、BI呈正相關(guān)(P＜0.01),而IL-8與AL、PLI呈負(fù)相關(guān)(P＜0.01

8、),與BI無相關(guān)(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.本實(shí)驗(yàn)成功建立模擬高原低氧條件下牙周炎動(dòng)物模型,牙周組織病理變化表現(xiàn)為典型的活動(dòng)期牙周炎的病理改變,且炎癥反應(yīng)程度重、炎癥發(fā)展快。
　　 2.與常氧實(shí)驗(yàn)組相比,在模擬海拔5000米低氧環(huán)境下,牙周炎模型大鼠牙周組織中TNF-α、PGE2的表達(dá)增高而IL-8表達(dá)降低,提示牙周組織中TNF-α、PGE2、IL-8的表達(dá)水平不同與低氧環(huán)境有關(guān)。