基質(zhì)金屬蛋白酶及其組織抑制劑在牙周炎動(dòng)物模型牙周組織中表達(dá)的研究.pdf

1、牙周病是一組由菌斑細(xì)菌引起的炎癥性疾病，是人類口腔的常見(jiàn)病、多發(fā)病，也是成人失牙的主要原因；牙周病的病因及發(fā)病機(jī)理非常復(fù)雜，到目前為止，人們對(duì)它的認(rèn)識(shí)尚不十分清楚：在牙周病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，尤其是在牙周組織的破壞和降解過(guò)程中，基質(zhì)金屬蛋白酶家族(matrixmetalloproteinases，MMPs)發(fā)揮著重要的作用。MMPs是一類酶活性中心含有二價(jià)鋅離子、且蛋白結(jié)構(gòu)相似、編碼基因與膠原酶基因同源的蛋白分解酶家族。目前已發(fā)現(xiàn)的MMP

2、s有20多種，分為6大類：膠原酶、明膠酶、基質(zhì)溶解酶、基質(zhì)降解素、膜型基質(zhì)金屬蛋白酶及其他MMPs。研究較透徹的MMPs有7種，主要是三類：膠原酶、明膠酶和基質(zhì)分解素類。MMP-1和MMP-8屬于膠原酶，主要降解Ⅰ～Ⅲ型膠原及Ⅶ和Ⅹ型膠原。基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑(tissue inhibitor ofmetalloproteinase，TIMPs)是能特異性地抑制MMPs活性的一組多功能因子，TIMPs家族由4個(gè)成員組成：TIMP-1

3、，TIMP-2，TIMP-3和TIMP-4。由于牙周組織取材困難，目前對(duì)MMPs和TIMPs的研究多集中于牙周炎患牙部位的牙齦組織和齦溝液中的表達(dá)情況，而要進(jìn)一步了解二者在牙周病變過(guò)程中的作用，尚需對(duì)其在牙周炎患牙牙周膜及牙槽骨中的分布及水平進(jìn)行研究。因此，本文聯(lián)合使用高糖飼料喂飼、絲線結(jié)扎動(dòng)物牙頸部和口腔局部接種牙周可疑致病菌的方法，建立不同時(shí)期、不同嚴(yán)重程度的大鼠牙周炎模型，獲得牙周炎的病變組織，采用免疫組化的方法對(duì)MMP-1、MM

4、P-8、TIMP-1和TMP-2在病變牙周組織的表達(dá)進(jìn)行定位及半定量分析，結(jié)果顯示：1)．上述建模方法的聯(lián)合使用可以獲得較為理想的不同時(shí)期、不同嚴(yán)重程度的大鼠牙周炎模型。2)．MMP-1、MMP-8在牙周炎病變組織中，隨著炎癥進(jìn)程呈現(xiàn)不同特征性的表達(dá)：在健康大鼠牙周組織部位有弱陽(yáng)性表達(dá)，在牙齦炎、牙周炎的牙齦上皮中呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，在牙周炎的牙廚組織中，主要在牙周膜成纖維細(xì)胞、破骨細(xì)胞等細(xì)胞中呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。MMP-1、MMP-8在各組大鼠牙

5、周炎模型牙周組織中表達(dá)的變化趨勢(shì)為：由健康牙周組織的弱陽(yáng)性表達(dá)，變?yōu)榧毙札l炎、急性牙周炎時(shí)的強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，到慢性牙周炎時(shí)期，表達(dá)較急性期有所降低。3)．TMP-1，TIMP-2在正常大鼠的牙齦上皮組織中幾乎不表達(dá)，在牙周膜成纖維細(xì)胞、牙槽骨邊緣細(xì)胞(前成骨細(xì)胞)中有較弱的表達(dá)，而在牙周炎病變組織中的表達(dá)明顯增強(qiáng)；在牙周炎的急性期和慢性期TMP-1，TIMP-2的水平呈現(xiàn)隨炎癥程度變化而變化的趨勢(shì)，但TIMP-1,TIMP-2表達(dá)水平的這種

6、變化尚不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 本文結(jié)果顯示：高糖水喂飼+牙頸部絲線結(jié)扎在28天時(shí)可使大鼠形成典型的牙周炎；采用高糖水+牙頸部絲線結(jié)扎+接種P.gingivalis，能在14天時(shí)觀察到急性重度牙周炎的表現(xiàn)，28天時(shí)病變進(jìn)入慢性期；而采用高糖水+牙頸部絲線結(jié)扎+接種混合菌的方法，能獲得更嚴(yán)重的牙周炎病變模型。 MMP-1、MMP-8在大鼠牙周炎模型牙周組織中表達(dá)，隨著炎癥進(jìn)程呈現(xiàn)不同的水平表達(dá)：在健康大鼠牙周組織有弱陽(yáng)性表達(dá)，在

7、牙齦炎、牙周炎的牙齦上皮中呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，在牙周炎的牙周組織中，主要在牙周膜成纖維細(xì)胞、破骨細(xì)胞等細(xì)胞中呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，MMP-1、MMP-8在各組大鼠牙周炎模型牙周組織中表達(dá)的變化趨勢(shì)為：由健康牙周組織的弱陽(yáng)性表達(dá)，變?yōu)榧毙札l炎、急性牙周炎的強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，到慢性牙周炎時(shí)期，表達(dá)水平較急性期降低；TIMP-1和TIMP-2在牙周炎癥組織中，隨著炎癥進(jìn)程呈現(xiàn)不同水平的表達(dá)：在健康大鼠牙周組織部位有弱陽(yáng)性表達(dá)，在牙齦炎、牙周炎的炎細(xì)胞浸潤(rùn)區(qū)域，炎

8、細(xì)胞、破骨細(xì)胞及牙周膜成纖維細(xì)胞中呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。TIMP-1和TIMP-2在各組大鼠牙周炎模型牙周組織中表達(dá)的變化趨勢(shì)為：由健康牙周組織的弱陽(yáng)性表達(dá)，變?yōu)榧毙札l炎、急性牙周炎時(shí)的強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，到慢性牙周炎階段，表達(dá)水平較急性期呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)；表明MMP-1、MMP-8及、TIMP-1、TIMP-2的表達(dá)水平隨著牙周炎病變的發(fā)生發(fā)展而發(fā)生變化，呈現(xiàn)出與牙周組織炎癥程度相一致的變化趨勢(shì)，提示MMPs及TIMPs參與了牙周炎癥的發(fā)生發(fā)展及牙周組