小尾寒羊TGF-β1和GDF9基因多態(tài)性及其與繁殖力關(guān)系的研究.pdf

1、中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文小尾寒羊TGF-β1和GDF9基因多態(tài)性及其與繁殖力關(guān)系的研究姓名：高麗霞申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：動(dòng)物遺傳育種與繁殖指導(dǎo)教師：杜立新20070601A B S T R A C TL i v e s t o c kb r e e d i n g t r a i t i so n e o fi m p o r t a n t e c o n o m i c t r a i t s ．I t ’8d i f f i

2、c u l t t oi m p r o v e t h ep r o p e r t i ma c c o r d i n g t r a d i t i o n a l m e t h o d s b e c a u s e t h e n u m b e r o f s h e e p l a m b i n g i s l o w g e n e t i c t r a i t s( O ．0 3 - 0 ．1 ) ．F i n

3、 d i n gc o n t r o lm e c h a n i s m f o r o v u l a t i o nr o t ea n d l i n e rs i z eo f t h em a j o rg e n e s ( o rm u t a t i o n )a r o u s e dw i d e s p r e a d c o n c c n l o f b r e e d i n gs h e e p j u

4、 r i s t st h r o u g h o u tt h ew o r l d ．G a n e i sas i g n i f i c a n tf a c t o ra f f e c t i n g f e t a l s h e e p ．D i f f e r e n t g e n e t i c v a r i a t i o no fs h e e po v u l a t i o nr a t ep r o v

5、 i d ea n i d e a l m o d e l f o re x p l o r i n gt l l em e c h a n i s m o f r e g u l a t i n gf o l l i c l ed e v e l o p m e n ta n dr e v e a l i n gg e n e c o n t r o l e do v u l a t i o n ，w h i c h n l a k

6、e i tp o s s i b l et o i d e n t i f i c a t em a j o r g e n e sa f f e c t i n gt h e o v u l a t i o n r a t e ．I nt h i s s t u d y , t r a n s f o r m i n g g r o w t hf a c t o rb e t al ( T G F - p 1 ) a n d g r

7、o w t hd i f f e r e n t i a t i o n f a c t o r 9( G D F 9 ) a sc a n d i d a t eg e n e sf o rt h eL i t t l e - t a i l e dH a r ts h e e pw e r e d i dp o l y m o r p h i ca n a l y s i s 。i no r d e r t or e v e a l

8、t h er c l a t i o n s h i pb e t w e e nt w ok i n d so f c e l l f a c t o r sa n dt h es h e e pr e p r o d u c t i o np e r f o r m a u r * ．T h ee x p e r i m e n ts e l e c t s1 9 6s h e e p f o r m a t e r i a l s

9、 i n c l u d i n g L i t t l e - t a i l e d H a n ，T o n g ，T a n a n d O u l a ，a n a l y s i s e dt h e h e r e d i t a r yf o rr a F - f l la n dt h eG D F 9 i nd i f f e r e n ts h e e pb yP C R - R F L P a n d P C

10、R - S S C P t e c h n o l o g y ．T h e r e s u l t sw e r e a sf o I l o w s ：F i r s t l y ，a n a l y s i s e da m p l i f i c a t i o n f r a g m e n t f o r2 - 5 ．6 - 7e x o 餾o fT G F - f l l g e n e ，t h e r e w e r

11、e ap o l y m o r p h i c l o c u si n8 0 5 b p s e q u e n c e o f 6 —7o x e n b yP C R - S S C E6 - 7e x o nr e g i o n w a sc l o n e da n ds e q u e n c e d ，w h i c hs h o w e da m u t a t i o n a n dr e v e a l e da

12、A G A Cd e l e t i o ni n u p s t r e a m 2 9 4 o f e x o n 7o fT G F - 盧Ig e n e ( s i t e1 42 0 1 i ng i 7 6 8 7 1 7 5 6 ) ．T h e s t a t i s t i c a lr e s u l to fg e n o t y p oa n dg e n e f r e q u e n c y i n d i

13、 f f e r e n tb r e e d ss h o w e dt h a t t h e g e n o t y p e A Bd o m i n a t e di n t h eL i u l e - t a i l e d H a ns h e e p ．t h eg e n o t y p oB Bw a si n m a j o r i t yi nl o w - f e c u d i t ys h e e p ．A

14、 l lt h ep o p u l a t i o n sw e r ei n i n t e r m e d i a t e p o l y m o r p h i s m ．M e a n w h i l ew ef o r e c a s t e d t h e c o n t r o l e l e m e n ta n dp r o t e i nb i n d i n g s i t e si nm u t a t i o

15、 np o i n t ，T h e r e s u l t ss h o w e d A B h a d t h r e n a c t i v a t e dp r o t e i nt r a n s c r i p t i o nf a c t o rA P - l ( a c t i v a t o r p r o t e i n1 ) c o m p a r i n gt h a ng e n o t y p e o f A

16、 A a n dB B ．m r e l a t i o n s h i po f l e a s ts q u a r e sm e a n sf o rI i t t e r s i z e W a SA B > B B > A A i nL i t t l e - t a i l e dH a ns h e e p ．b u td i f f e r e n c ．a(chǎn) m o n g t h et h r e eg e

17、 n o t y p e sh a v e n ’td i f f e rs i g n i f i c a n t l y ( P > 0 ．0 5 ) ．S e c o n d l y ，4 p a i r sp r i m e r s w e r ed e s i g n e d t oa m p l i 如f r a n g m e n t a n dP C R - S S C P i n & A n n 2 o

18、f G D F 9g e n e i n s h e e p ，O l l l yf i n d i n go n ep o l y m o r p h i cl o c u si nP 2p r i m e r ．T h e r e w e r e t w ob a s e m u t a t i o n s( T - + C i n5 5 8 a n d T - - - , Ci n6 9 2 ) i n P 2 p r i m e

19、 r sa m o n g L i t t l e - t a i l e dH a n ，T o n g ，T a n a n dO u l a ．W h i c hs h o w e dan e w m u t a t i o no ft _ + C i n5 5 8a n dT - - ．Ci n6 9 2 i nf o u rs h e e pb r e e d s ．T h em u t a t i o nc a l L s

20、c d2 3 1 - a m i n o a c i d l e u e i n e t u r n i n t o t h r e e n i n o ．．T h e m u t a t i o n i n f o u rs h e e pb r e e d s w e r e l o w p o l y m o r p h i s m ．T h eL i t t l e - t a i l e dH a ns h e e pe w

21、e sw i t hg e n o t y p eC C h a dO ．6 3 ( P < O ．0 5 ) l a m b sm o r et h a nt h o s ew i t hg e n o t y p e C D ·w h i c h d i f f e r s i g n i f i c a n t l y ．L a s t l y ，w ea n a l y s i s e dt h e c o r

22、r e l a t i o nf o rp o l y m o r p h i c l o c u so f T G F - f l la n dG D F 9 g e n ec o m b i n e dw i m t h el i t t e r s i z eo f L i t t l e - t a i l e dH a n s h e e p ．T h e r e a r en o t a b l ec o r r e l a

23、 t i o nb e t w e e n T G F - f l Ig e n o t y p e sa n dl i t t e r s i z e ( R = 0 ．2 6 6 2 1 ) ，G D F 9g e n o t y p ea n d l i t t e rs i z e ( R = O ．2 8 8 3 9 ) ，n on o t a b l ec o r r e l a t i o nb e t w e e n r