氬氦冷凍消融治療乙肝相關(guān)性肝細(xì)胞癌后調(diào)節(jié)性T細(xì)胞變化及其對(duì)預(yù)后的影響.pdf

1、研究背景：氬氦刀(argon-helium cryosurgical ablation system，CSA)是一種新的冷凍外科(cryosurgery)治療手段，其基本原理是利用氬氣快速制冷產(chǎn)生的超低溫(<-140℃)作用于病變組織引起細(xì)胞內(nèi)外冰晶形成、細(xì)胞脫水，氦氣快速?gòu)?fù)溫(20-40℃)，導(dǎo)致腫瘤組織細(xì)胞壞死。目前這種微創(chuàng)外科技術(shù)是無(wú)法切除的中晚期HCC最為主要的局部治療方法。氬氦刀除了對(duì)腫瘤的直接清除作用外，還能增強(qiáng)術(shù)后的抗腫瘤

2、免疫。近年研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤周圍有大量CD4+CD25+FoxP3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(reguolatory T cells，Treg)浸潤(rùn)，通過(guò)抑制或殺傷效應(yīng)性CD8+或CD4+T細(xì)胞而抑制機(jī)體的抗腫瘤免疫；相反，通過(guò)去除荷瘤鼠體內(nèi)的Treg細(xì)胞可使抗腫瘤作用增強(qiáng)。我們的前期研究顯示，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量的升高與HCC患者預(yù)后較差有關(guān).本研究通過(guò)氬氦刀冷凍治療HCC患者，了解冷凍治療對(duì)HCC患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞表達(dá)的影響，同時(shí)探索調(diào)節(jié)性T細(xì)胞變化對(duì)H

3、CC患者預(yù)后的影響及其意義。
　　 方法：利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)101例HCC患者外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞頻率，同時(shí)對(duì)34例HCC病人進(jìn)行氬氦刀治療，隨訪治療前后調(diào)節(jié)性T細(xì)胞頻率及功能的變化，分析調(diào)節(jié)性T細(xì)胞頻率變化與血清AFP水平之間的相關(guān)性，同時(shí)在治療前后取原位肝癌組織進(jìn)行免疫組化檢測(cè)CD4、CD8和FoxP3。
　　 結(jié)果：我們觀察到：(1)隨著肝癌的進(jìn)展，外周血中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞頻率逐漸增加，早期、中期、進(jìn)展期、終末期HCC患

4、者的Treg頻率分別為6.89±1.27％，9.13±1.36％，10.32±2.04％和13.4±2.81％。(2)氬氦冷凍治療后腫瘤緩解的17例HCC病人，隨訪結(jié)束時(shí)其Treg頻率較術(shù)前降低，其中7例術(shù)前AFP陽(yáng)性(>20ng/mL)的患者，術(shù)后Treg頻率亦隨AFP的降低而降低；對(duì)于腫瘤進(jìn)展的14例HCC病人，隨訪結(jié)束時(shí)其Treg頻率較術(shù)前明顯升高，其中9例術(shù)前AFP陽(yáng)性(>20ng/mL)的患者，腫瘤進(jìn)展時(shí)亦伴有AFP的再次升高

5、。(3)在治療前后HCC患者Treg細(xì)胞對(duì)于健康人PBMC均有免疫抑制功能，其免疫抑制功能與是否治療及腫瘤是否進(jìn)展無(wú)關(guān)。(4)氬氦冷凍治療后HCC患者冷凍區(qū)域旁腫瘤組織浸潤(rùn)的CD8+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞和FoxP3+T細(xì)胞的數(shù)量均顯著低于術(shù)前，治療后的FoxP3+/CD8+比值較術(shù)前明顯降低。
　　 結(jié)論：氬氦冷凍消融治療可降低HCC患者Treg頻率，Treg頻率的變化具有判斷HCC病人腫瘤是否進(jìn)展的意義，尤其是AFP陰性的H