盤(pán)羊和巴什拜羊MHC-DRB1、DRB3基因多態(tài)性與綿羊肺炎支原體感染相關(guān)性研究.pdf_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè),還剩110頁(yè)未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、主要組織相容性復(fù)合體(Major Histocompatibility Complex,MHC)是脊椎動(dòng)物染色體中緊密連鎖、高度多態(tài)的區(qū)域,OLA是綿羊淋巴細(xì)胞表面抗原(Ovine Lymphocyte Antigen)即綿羊 MHC的簡(jiǎn)稱。MHC基因的高度多態(tài)性對(duì)病原的免疫識(shí)別起重要作用,特別是 MHC-Ⅱ類分子的 DRB基因編碼的抗原具有重要的免疫調(diào)控作用,與許多動(dòng)物疾病的易感性、抗性及免疫應(yīng)答密切相關(guān)。綿羊肺炎支原體(Mycopl

2、asma ovipneumoniae,M.O)是傳染性胸膜肺炎的病原之一,主要引起綿羊、山羊及野生綿羊發(fā)病,且不同綿羊品種對(duì) M.O的易感性存在明顯差異。本研究在野生盤(pán)羊與新疆地方品種巴什拜羊雜交一代羔羊暴發(fā)綿羊支原體肺炎確診基礎(chǔ)上,利用綿羊肺炎支原體抗體 Elisa試劑盒檢測(cè)盤(pán)羊和巴什拜羊,采用 PCR-RFLP方法檢測(cè)分析 M.O陽(yáng)性及陰性巴什拜羊和盤(pán)羊OLA-DRB1、DRB3外顯子2多態(tài)性及差異,探索兩種不同品種綿羊 OLA與

3、M.O感染的相關(guān)性,為進(jìn)一步開(kāi)展綿羊雜交、抗病育種提供理論依據(jù)。試驗(yàn)主要內(nèi)容和結(jié)果如下:
  1、為查明某動(dòng)物園盤(pán)羊呼吸性疾病的原因,從發(fā)病盤(pán)羊群采集的病料中分離出5株支原體。通過(guò)菌落形態(tài)觀察、生化反應(yīng)、PCR鑒定和動(dòng)物回歸試驗(yàn)及序列測(cè)定,確診引起盤(pán)羊發(fā)病的病原是綿羊肺炎支原體(M.O)。此結(jié)果為國(guó)內(nèi)外首次報(bào)道,為 M.O感染的流行病學(xué)特征增加了新內(nèi)容。
  通過(guò)對(duì) PCR擴(kuò)增條件優(yōu)化以及擴(kuò)增的特異性、敏感性分析,建立了快速

4、簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)實(shí)用的檢測(cè)盤(pán)羊肺炎支原體感染的 PCR方法。
  2、采用 PCR-RFLP方法,檢測(cè)盤(pán)羊與巴什拜羊 OLA-DRB3基因外顯子2的遺傳多態(tài)性;分別對(duì) M.O陰性和陽(yáng)性盤(pán)羊與巴什拜羊 OLA-DRB3外顯子2基因型頻率及等位基因頻率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和差異性檢驗(yàn)。
  結(jié)果顯示,盤(pán)羊與巴什拜羊 OLA-DRB3基因外顯子2在 Taq I、Pst I和 HaeⅢ酶切位點(diǎn)存在豐富的多態(tài)性,盤(pán)羊群體檢測(cè)出9種基因型,8種等位基

5、因,巴什拜羊出現(xiàn)24種基因型和11種等位基因;在第122、154、168和241堿基處,盤(pán)羊與巴什拜羊 OLA-DRB3基因外顯子2均表現(xiàn)出多態(tài)性。盤(pán)羊的 Pst I、HaeⅢ位點(diǎn)和巴什拜羊的 Taq I、Pst I位點(diǎn)達(dá)到 Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),其余位點(diǎn)未達(dá)到平衡狀態(tài)(P﹤0.01);盤(pán)羊OLA-DRB3外顯子2的基因雜合度、多態(tài)信息含量和有效等位基因數(shù)分別為0.300、0.3339和1.5037,巴什拜羊

6、的對(duì)應(yīng)參數(shù)值為0.541、0.4854和3.2918,表明巴什拜羊遺傳變異程度較高,盤(pán)羊具有較為穩(wěn)定的基因遺傳結(jié)構(gòu)。
  OLA-DRB3基因中,盤(pán)羊 HaeⅢ-AA(P﹤0.01)、巴什拜羊 HaeⅢ-BC(P﹤0.05)為 M.O抗性基因型,巴什拜羊 HaeⅢ-DD(P﹤0.05)為 M.O易感基因型,Pst I A(P﹤0.01)和 Pst I B(P﹤0.01)、HaeⅢ C(P﹤0.01)分別是巴什拜羊 M.O易感和抗性

7、相關(guān)等位基因。
  3、以 PCR-RFLP方法,檢測(cè)盤(pán)羊與巴什拜羊 OLA-DRB1基因外顯子2的遺傳多態(tài)性;分別對(duì) M.O陰性和陽(yáng)性盤(pán)羊與巴什拜羊 OLA-DRB1外顯子2基因型頻率及等位基因頻率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和差異性檢驗(yàn)。
  在 SacI、BsaHI和 HaeIII酶切位點(diǎn),盤(pán)羊與巴什拜羊的 OLA-DRB1基因外顯子2多態(tài)性豐富,盤(pán)羊檢測(cè)出8種基因型6種等位基因,巴什拜羊出現(xiàn)12種基因型9種等位基因。二者均在第296

8、、178、173、123、118和71bp等6個(gè)堿基位點(diǎn)存在多態(tài)性。盤(pán)羊 SacI位點(diǎn)呈 Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(P>0.05),巴什拜羊和盤(pán)羊的其它位點(diǎn)均未達(dá)到平衡狀態(tài);盤(pán)羊的基因雜合度、多態(tài)信息含量和有效等位基因數(shù)為0.327、0.3604和1.5102,巴什拜羊的對(duì)應(yīng)數(shù)值分別為0.479、0.4794和2.8925,表明2個(gè)品種 OLA-DRB1基因的遺傳變異程度均呈中度多態(tài)。
  對(duì) M.O陰性和陽(yáng)性羊基因型

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論