梗阻性腎病中腎小管周圍毛細血管損傷和依那普利保護作用的實驗研究.pdf

1、該課題通過建立大鼠單側(cè)輸尿管完全梗阻(complete unilateral ureteral obstruction,CUUO)模型,來觀察PTC的密度、形態(tài)學變化以及血管內(nèi)皮細胞生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白的表達水平,分析其相關性以及與腎小管上皮細胞凋亡和間質(zhì)纖維化之間的關系;進一步應用依那普利進行干預治療,觀察其對PTC和腎小管的保護作用.方法:選用42只剛斷乳雄性

2、Sprague-Dawley(SD)大鼠進行動物實驗.在氯氨酮麻醉下,36只大鼠用4-0絲線雙重結扎左側(cè)腎盂輸尿管連接部,制成單側(cè)輸尿管完全梗阻(CUUO)模型.術后0、1、7、14、28天,分別隨機選擇6只CUUO模型大鼠,麻醉下收藏腎臟標本后,采取斷髓法處死.治療組隨機選6只CUUO模型大鼠,麻醉下收獲腎臟標本后,采取斷髓法處死.治療組隨機選6只CUUO模型大鼠,從第五天開始在其飲用水中加入依那普利(200mg/L),直至第14天收

3、集腎臟標本.假手術(SO)組6只大鼠僅剖腹暴露輸尿管后不作結扎,術后第14天收集腎臟標本.所有腎臟標本常規(guī)病理切片,分別用HE、PAS和Masson染色觀察組織學變化.用電鏡技術研究腎小管上皮細胞和PTC的形態(tài)學變化,用Flk-1標記PTC后進行密度測定.用TUNEL方法檢測原位細胞凋亡,免疫組織化學方法檢測VEGF蛋白表達水平.用Leica圖像分析系統(tǒng)對VEGF蛋白的表達強度和間質(zhì)纖維化程度進行半定量檢測.結論:大鼠的CUUO模型中,