低聚果糖改善實(shí)驗(yàn)性代謝綜合征大鼠的作用及其機(jī)制研究.pdf

1、一、研究背景:
　　 代謝綜合征(metabolicsyndrome，MS)是人類(lèi)物質(zhì)不斷豐富、運(yùn)動(dòng)逐漸減少、壓力不斷增加的結(jié)果。隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人們的飲食習(xí)慣、生活方式發(fā)生了巨大改變，MS患病率逐漸上升，且發(fā)病呈低齡化趨勢(shì)，兒童中已經(jīng)有MS的出現(xiàn)。MS對(duì)臨床預(yù)后至關(guān)重要，與發(fā)生2型糖尿病、冠心病、其他動(dòng)脈粥樣硬化性血管病及多囊卵巢綜合征密切相關(guān)，可加速冠心病和其他動(dòng)脈粥樣硬化性血管病的發(fā)生發(fā)展和死亡危險(xiǎn)，MS已成為嚴(yán)重威脅我國(guó)

2、人民健康的公共衛(wèi)生問(wèn)題。因此，深入研究MS的作用機(jī)制，治療措施，具有十分重要的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)意義。
　　 近年來(lái)有關(guān)代謝綜合征的研究很多，大量研究已經(jīng)證實(shí)，代謝綜合征與不合理的飲食關(guān)系密切，高脂高糖飲食可誘導(dǎo)代謝綜合征的形成和加速疾病的進(jìn)程。開(kāi)發(fā)和研制具有預(yù)防和治療代謝綜合征的功能性食品具有重要的意義。
　　 低聚果糖(Fructo-oligosaccharide，F(xiàn)OS)作為益生元的一種，廣泛的存在于蔬菜、水果、谷物當(dāng)中，

3、如韭菜、洋蔥、大蒜、香蕉、小麥、蜂蜜等。經(jīng)過(guò)多年的深入研究，世界上許多國(guó)家(包括中國(guó))已確認(rèn)低聚果糖具有調(diào)節(jié)血脂、降低血糖、改善腸道功能、防治便秘和腹瀉、提高人體免疫力等作用。但以往都是基于單病種的研究，而有關(guān)低聚果糖治療代謝綜合征的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。
　　 本課題基于現(xiàn)今關(guān)于代謝綜合征的研究進(jìn)展，用高脂高糖飼料制備符合臨床代謝綜合征特點(diǎn)大鼠模型，并進(jìn)行為期4周的低聚果糖干預(yù)實(shí)驗(yàn)研究，從代謝綜合征的整體觀察低聚果糖對(duì)改善代謝綜合征

4、大鼠肥胖、血脂紊亂、高血糖、胰島素抵抗等作用，觀察低聚果糖對(duì)代謝綜合征大鼠抗氧化作用、抑制炎癥反應(yīng)作用，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，研究低聚果糖對(duì)代謝綜合征大鼠visfatin的表達(dá)調(diào)控作用，及對(duì)腸-胰島軸GIP、GLP-1表達(dá)的影響。研究低聚果糖對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物代謝綜合征的治療作用及作用機(jī)制，為開(kāi)發(fā)具有預(yù)防和治療代謝綜合征的功能性保健食品提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 二、研究?jī)?nèi)容:
　　 (一)目的
　　 1.用高脂高糖飼料

5、制備代謝綜合征大鼠模型。
　　 2.研究低聚果糖對(duì)代謝綜合征大鼠的治療作用。
　　 3.研究低聚果糖治療代謝綜合征大鼠的作用機(jī)制。
　　 4.為低聚果糖預(yù)防和治療代謝綜合征提供科學(xué)的依據(jù)。
　　 (二)方法
　　 1.代謝綜合征大鼠模型的復(fù)制
　　 清潔級(jí)雄性健康Sprague-Dawley(SD)大鼠80只，體重(180g～210g)，實(shí)驗(yàn)前為大鼠稱(chēng)重，按體重隨機(jī)分為8組，每組10只，分

6、別為：空白對(duì)照前組(Pr-C)：進(jìn)食普通飼料，空白對(duì)照后組(Po-C)，進(jìn)食普通飼料，主要與模型后組進(jìn)行比較，模型對(duì)照前組(Pr-M)，造模成功時(shí)檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)，主要與空白對(duì)照前組和模型對(duì)照后組進(jìn)行比較，模型對(duì)照后組(Po-M)，造模成功后繼續(xù)給予高脂高糖飼料喂養(yǎng)，低聚果糖高劑量組(F-H)，低聚果糖中劑量組(F-M)，低聚果糖低劑量組(F-L)，西格列汀組(ST)。
　　 造模組和干預(yù)組均喂以高脂高糖飼料(10kg飼料含量：豬油

7、1.5kg、蔗糖2kg、膽固醇0.25kg、膽鹽0.03kg、食鹽0.5kg、添加劑0.2kg、其余4.7kg普通飼料)，對(duì)照組喂以普通飼料，大鼠自由進(jìn)食，每天稱(chēng)量飼料，每周稱(chēng)量大鼠體重，造模0、4w、8w時(shí)監(jiān)測(cè)血糖、血脂情況，12w結(jié)束造模實(shí)驗(yàn)，處理空白對(duì)照前組(Pr-C)和模型對(duì)照前組(Pr-M)，采集血清和肝腸組織等標(biāo)本檢測(cè)指標(biāo)。
　　 2.干預(yù)分組與方法
　　 低聚果糖高劑量(560mg/kg.d-1)、低聚果糖

8、中劑量組(280mg/kg.d-1)、低聚果糖低劑量組(140mg/kg.d-1)、藥物治療組：西格列汀配成0.1％濃度，按4mg/kg.d-1灌胃，低聚果糖干預(yù)各組用2.5％低聚果糖溶液按劑量灌胃，除正常對(duì)照后組喂以普通飼料，其余各組均仍喂以高脂高糖飼料，喂養(yǎng)4周，結(jié)束試驗(yàn)。
　　 3.指標(biāo)檢測(cè)
　　 (1)生化檢測(cè)：觀察低聚果糖對(duì)代謝綜合征大鼠體重、血糖、血脂改善作用。采用日本日立7600-020型全自動(dòng)生化分析儀檢

9、測(cè)各組大鼠血清甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、空腹血糖(FBS)等指標(biāo)。
　　 (2)抗氧化酶學(xué)指標(biāo)：采用試劑盒檢測(cè)血清SOD、GSH-Px、MDA水平改變。
　　 (3)細(xì)胞因子檢測(cè)：免疫組化方法檢測(cè)大鼠血清TNF-α、IL-6、visfatin的改變。
　　 (4)表達(dá)調(diào)控檢測(cè)：采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)低聚果糖對(duì)代謝綜合征大鼠脂肪組

10、織visfatinmRNA，以及腸道組織GLP-1及GIP基因表達(dá)的影響。
　　 4、數(shù)據(jù)處理
　　 計(jì)量資料以(x-±s)表示，多組間均數(shù)比較采用LSD單因素方差分析，計(jì)數(shù)資料采用非參統(tǒng)計(jì)分析H檢驗(yàn)。采用SPSS15.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 三、結(jié)果:
　　 1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)干預(yù)研究
　　 (1)成功的用高脂高糖飼料制備與臨床代謝綜合征相似大鼠模型。
　　 (2)低聚果糖可以改善代謝綜

11、合征大鼠糖脂代謝及抗氧化應(yīng)激等指標(biāo)。
　　 2.低聚果糖治療代謝綜合征機(jī)制研究
　　 (1)低聚果糖能夠降低血清IL-6、TNF-α含量。
　　 (2)低聚果糖可抑制visfatinmRNA在內(nèi)臟脂肪中的表達(dá)，而降低血清visfatin水平。
　　 (3)低聚果糖可以增加腸道細(xì)胞GLP-1mRNA表達(dá)，而對(duì)GIPmRNA表達(dá)水平無(wú)影響。
　　 四、結(jié)論:
　　 1、成功地用高脂高糖飼料制備