薄層色譜生物自顯影跟蹤分離天然單胺氧化酶抑制劑的研究.pdf

1、目前，單胺氧化酶(Monoamine oxidase，MAO)抑制劑在治療阿爾茨海默癥，抑郁癥和帕金森病方面具有重要作用，但是現(xiàn)有的藥物大多存在副作用。因此開展從天然植物當(dāng)中尋找MAO抑制劑的研究，尋找母核結(jié)構(gòu)新穎的化合物對發(fā)現(xiàn)新藥具有重要的指導(dǎo)意義。為了準確快速的得到活性單體化合物，本課題對天然單胺氧化酶抑制劑薄層色譜(Thin Layer Chromatography，TLC)生物自顯影方法進行了研究。
　　(1)構(gòu)建了MAO

2、抑制劑的TLC生物自顯影方法。
　　a.適用于MAO抑制劑TLC生物自顯影顯色劑的篩選。
　　篩選了14種酚類化合物，發(fā)現(xiàn)同種酚類化合物反應(yīng)后出現(xiàn)的顏色是屬于同一色系的。但是遺憾的是這些化合物的顯色反應(yīng)在執(zhí)行TLC生物自顯影實驗時，沒有產(chǎn)生預(yù)期的背景顏色。原因可能是因為它們對MAO起到了抑制作用，反應(yīng)沒有生成H2O2。
　　b.用MTT代替文獻方法中的NBT為顯色劑，得到了一套反應(yīng)時間短，重現(xiàn)性好，酶用量少，背景明顯的

3、TLC生物自顯影方法。改進的TLC生物自顯影方法可檢測到的磷酸異丙煙肼的最小劑量為1×10-2μg，氯吉靈的最小劑量為1×10-2μg，帕吉林的最小劑量為1×10-2μg。
　　(2)利用改進的TLC生物自顯影方法對34種中藥有機酸提取物進行了抗MAO活性測定。發(fā)現(xiàn)路路通有機酸提取物很有可能含有天然MAOIs。對其有機酸提取物進一步分離，得到了4種未被報道過的活性較好的天然MAOIs，分別是沒食子酸，沒食子酸乙酯，對-二沒食子酸，