銅綠金龜子幼蟲酚氧化酶酶學(xué)性質(zhì)及其抑制劑研究.pdf

1、酚氧化酶(phenoloxidase，EC.1.14.18.1，簡(jiǎn)稱PO)又稱絡(luò)氨酸酶、兒茶酚氧化酶等，是結(jié)構(gòu)復(fù)雜的多亞基的含銅氧化還原酶。它廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物、昆蟲及人體內(nèi)，位于黑素細(xì)胞的黃素體中，與黃素體膜結(jié)合，只有極小部分以游離形式存在。它是昆蟲體內(nèi)的一種重要酶類，在昆蟲的變態(tài)發(fā)育和免疫系統(tǒng)中起著重要作用。由于酚氧化酶具有重要的理論意義和發(fā)展前景，大量的研究工作集中在此領(lǐng)域。
　　 本文以鞘翅目昆蟲銅綠金龜子An

2、omalacorpulentaMotsch幼蟲酚氧化酶為試驗(yàn)對(duì)象，對(duì)其進(jìn)行了部分純化，研究了該酶的基本酶學(xué)特性，并以曲酸、熊果甙、桑黃素、槲皮素、4-己基間苯二酚和4-十二烷基間苯二酚等六種化合物為效應(yīng)物研究其對(duì)該酶活性的抑制，并對(duì)其抑制參數(shù)及抑制動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了研究。結(jié)果表明：
　　 1.經(jīng)過(guò)35％飽和硫酸銨沉淀，銅綠金龜子幼蟲酚氧化酶的最適溫度為50℃，最適pH值為7.5，以L-多巴和鄰苯二酚為底物時(shí)，銅綠金龜子幼蟲酚氧化酶的K

3、m分別為11.11mmol·L-1和9.52mmol·L-1。
　　 2.研究曲酸、熊果甙、桑黃素、槲皮素、4-己基間苯二酚和4-十二烷基間苯二酚對(duì)銅綠金龜子幼蟲酚氧化酶活力的抑制作用，結(jié)果表明：以L-多巴為底物時(shí)，銅綠金龜子幼蟲酚氧化酶對(duì)曲酸、桑黃素、槲皮素、4-己基間苯二酚和4-十二烷基間苯二酚敏感，其IC50分別為0.65mmol·L-1、1.05mmol·L-1、0.146mmol·L-1、1.7μmol·L-1和1.2

4、μmol·L-1。
　　 3.研究曲酸、熊果甙、桑黃素、槲皮素、4-己基間苯二酚和4-十二烷基間苯二酚對(duì)銅綠金龜子幼蟲酚氧化酶活力的抑制作用類型，結(jié)果表明：以L-多巴為底物時(shí)，這六種效應(yīng)物對(duì)銅綠金龜子幼蟲酚氧化酶的抑制類型均為可逆性抑制類型。
　　 4.研究曲酸、熊果甙、桑黃素、槲皮素、4-己基間苯二酚和4-十二烷基間苯二酚對(duì)銅綠金龜子幼蟲酚氧化酶活力的抑制作用機(jī)理，結(jié)果表明：以L-多巴為底物時(shí)，曲酸、桑黃素、槲皮素、4