中藥糖苷的生物轉(zhuǎn)化結(jié)構(gòu)修飾.pdf

1、黃酮苷和甾體皂苷是兩類重要的中藥糖苷,糖基部分對二者的生物活性有著重要的影響。本論文以新月彎孢霉 Curvularia lunata3.4381和一株節(jié)桿菌屬菌株 Arthrobacter nitroguajacolicus作為生物催化劑分別對一系列黃酮苷和甾體皂苷進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾,分別研究了新月彎孢霉對黃酮苷糖基的水解作用和A. nitroguajacolicus對甾體皂苷的糖基合成作用。
　　黃酮苷是中藥中一大類重要的糖苷,且黃酮

2、苷的糖基被水解后活性通常有所改善,本論文研究了新月彎孢霉對黃酮苷糖基的水解作用。通過UPLC/PDA-Q-TOF-MSE對轉(zhuǎn)化產(chǎn)物進(jìn)行了檢測和結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果表明,新月彎孢霉可以水解部分黃酮苷的α-鼠李糖苷鍵或β-葡萄糖苷鍵,且該活性酶在菌株的細(xì)胞內(nèi)、外均有存在,但不是之前得到的甾體皂苷-α-1,2-鼠李糖苷酶。新月彎孢霉可以水解異鼠李素-3-O-新橙皮苷、香蒲新苷的末端的α-1→2鼠李糖苷鍵,但不能水解香蒲新苷、槲皮素-3-O-芹菜糖基

3、-(1→2)-[鼠李糖基-(1→6)]-葡萄糖苷和蘆丁中α-1→6連接的末端鼠李糖基;可以水解柚皮苷、淫羊藿苷和Floramanoside B的葡萄糖苷鍵,但不能水解槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷的O-葡萄糖苷鍵,也不能水解牡荊素和異牡荊素的C-葡萄糖苷鍵。本論文首次報(bào)道了新月彎孢霉對黃酮苷糖基的水解活性。
　　經(jīng)過對一系列菌株進(jìn)行的甾體皂苷糖基化活性的篩選,得到一株具有甾體皂苷糖基化活性的節(jié)桿

4、菌屬菌株 A. nitroguajacolicus。本論文以一系列甾體皂苷作為底物,研究了菌株A. nitroguajacolicus對甾體皂苷進(jìn)行糖基化修飾的規(guī)律。共選取了16種甾體皂苷作為底物,菌株A. nitroguajacolicus對10種底物有糖基化活性。分離制備了11個(gè)糖基化產(chǎn)物,8個(gè)通過MS、1D-NMR、2D-NMR(HSQC、HMBC、1H-1H COSY)進(jìn)行了確切的結(jié)構(gòu)鑒定,3個(gè)通過 UPLC-Q-TOF-MSE

5、進(jìn)行了結(jié)構(gòu)推斷。結(jié)果表明, A. nitroguajacolicus可以對呋甾皂苷的C-26位葡萄糖基的6-位羥基進(jìn)行果糖基化,對螺甾皂苷沒有糖基化活性。本論文利用從A. nitroguajacolicus中提取的粗酶作為生物催化劑,以蔗糖為糖源,在pH7,30 oC條件下,轉(zhuǎn)化率最高。本論文首次實(shí)現(xiàn)了利用節(jié)桿菌屬菌株 A. nitroguajacolicus,以蔗糖為非活化糖基供體,對甾體皂苷進(jìn)行果糖基化修飾,鑒定的8個(gè)糖基化產(chǎn)物均為